鸡CpG寡脱氧核苷酸疫苗佐剂制备技术规程 DB37_T 4038—2020 山东.pdfVIP

ICS 11.220 B 41 DB37 山 东 省 地 方 标 准 DB37/T 4038—2020 鸡CpG 寡脱氧核苷酸疫苗佐剂制备 技术规程 Preparation technique of CpG oligonucleotide adjuvant for chicken vaccines 2020 - 07 - 09 发布 2020 - 08 - 09 实施 山东省市场监督管理局 发 布 DB37/T 4038—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。 本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省农业科学院畜牧兽医研究所、齐鲁师范学院、山东润达检测技术有限公司。 本标准主要起草人：张琳、吴家强、朱广伟、黄艳艳、于江、张玉玉、许传田、艾武、张秀美、刘 军伟。 I DB37/T 4038—2020 鸡CpG 寡脱氧核苷酸疫苗佐剂制备技术规程 1 范围 本标准规定了鸡特异性CpG寡脱氧核苷酸疫苗佐剂的制备、检测、贮存等方面的技术规程。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 CpG寡脱氧核苷酸 CpG oligonucleotide，CpG ODN 含有未甲基化的CpG二核苷酸基序的核酸序列，能够在机体内诱导强烈的免疫反应。 3.2 硫代修饰 phosphorthioate modified 将核酸序列磷酸二酯键中的非桥氧原子置换成硫原子，主要用于防止反义实验中核酸被核酸酶降 解。 3.3 熔解温度 melting temperature，Tm 在DNA双螺旋结构热变性过程中紫外吸收值达到最大值的1/2时的温度。 3.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE 用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对DNA片段进行分离，然后从凝胶中回收、纯化目的DNA。 3.5 OD值 optical density value 表示被检测物吸收掉的光密度，是检测方法里的专有名词，检测单位用OD值表示。 4 试剂或材料 1 DB37/T 4038—2020 除另有规定外，所用试剂均为分析纯。 4.1 水：符合GB/T 6682—2008 一级水规定。 4.2 三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸(TE)缓冲液：附录A.1。 4.3 生理盐水。 4.4 去内毒素质粒大提试剂盒。 5 仪器设备 5.1 微量移液器：2.5 uL、10 uL、200 uL、1 000 uL。 5.2 高速离心机：离心力＞13 000 转/分钟。