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生物选修三知识点 专题 1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外 DNA 重组和转基因技术, 赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程 是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的,又叫做 DNA 重组技术。 (一)基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) 来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。 功能:能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部 位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。 结果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA 连接酶 两种 DNA 连接酶(E·coliDNA 连接酶和 T4-DNA 连接酶)的比较: ①相同点:都缝合磷酸二酯键。 ②区别:E·coliDNA 连接酶来源于 T4 噬菌体,只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间 的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间 的效率较低。 与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末 端,形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端,形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点,供外源 DNA 片段插入。 ③具有标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择。 最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并 具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。 其它载体: 噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步:目的基因的获取 目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。 原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转 录法_和化学合成法_。 PCR 技术扩增目的基因 原理:DNA 双链复制 过程:第一步:加热至 90~95℃DNA 解链;第二步:冷却到 55~60℃,引物结合到互 补 DNA 链;第三步:加热至 70~75℃,热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成。 ??二步:基因表达载体的构建 ;;;;动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫 、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较: ;6;10;;;10
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