酶工程酶制剂制备.pptxVIP

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CH 4 酶制剂的制备和精制 ; ;注意事项 ;CH 4.1 酶制剂的工业提取方法 1 细胞破碎方法;CH 4.1 酶制剂的工业提取方法 2 发酵液的预处理;CH 4.1 酶制剂的工业提取方法 3 酶蛋白的初步纯化与浓缩 ;调整硫酸铵溶液饱和度计算表;CH 4.1 酶制剂的工业提取方法 3 酶蛋白的初步纯化与浓缩;几种主要沉淀方法比较;CH 4.1 酶制剂的工业提取方法 3 酶蛋白的初步纯化与浓缩;CH4-2酶蛋白的提纯与精制;各类层析的原理和载体;CH4-2酶蛋白的提纯与精制 1 离子交换层析法 ;常用的阳离子交换剂 ;常用的阴离子交换剂 ;CH4-2酶蛋白的提纯与精制 1 离子交换层析法;离子交换层析原理示意图 ;CH4-2酶蛋白的提纯与精制 1 离子交换层析法;CH4-2酶蛋白的提纯与精制 2 分子筛层析法;; 吸附层析 (absorption chromatography) ;分 配 层 析 (distribuption chromatography) ;逆流分溶原理示意图;亲和层析(affiuity chromatography) ;亲和层析原理示意图 ;聚焦层析(Chromatofocusing);几种主要层析方法比较;;CH4-2酶蛋白的提纯与精制 3 酶蛋白纯度检测;;电泳技术分类;聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamidegel electrophoresis,PAGE) ;不连续PAGE的浓缩效应 ;SDS ;等电点聚焦(isoelectric focusing);琼脂糖电泳;不同浓度琼脂糖凝胶分离DNA的范围;毛细管电泳 (Capillary Electrophoresis,CE) ;毛细管电泳装置示意图;CH4-2酶蛋白的提纯与精制 3 酶蛋白纯度检测;三、 离心技术 ;离心机结构示意图; 沉降系数 (sedimentation coefficient);密度梯度离心法(density gradient);1、核酸密度的测定 ?= ?o + 4.2 ?2(?2- ?02)?10-10 2、测定DNA中G-C之含量 Rolfe-Meselson公式: ?= 0.100xG-C + 1.658 3、溶液中核酸构象的研究 ?:单链DNA?双链DNA ?蛋白质 双链DNA ?RNA 4、核酸的制备 氯化铯密度梯度超离心;沉降速率法( sedimentation velocity) ;分析型超速离心机;沉降平衡法( sedimentation eguilibrium );CH4-3 酶制剂的成型与保存 1 酶制剂的主要剂型及其制备;CH4-3 酶制剂的成型与保存 1 酶制剂的主要剂型及其制备;CH4-3 酶制剂的成型与保存 3 ??制剂的保存

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