微生物的实验室培养课件必威体育精装版.pptVIP

自养型微生物： 光能自养：光合细菌、蓝藻、显微藻类 化能自养：硝化细菌、铁细菌、硫细菌 异养型微生物： 绝大多数微生物 （二）微生物需要的营养物质1、碳源2、氮源3、无机盐4、水.......生长因子、维生素 4、某细菌的培养基的组成成分是葡萄糖、尿素、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁和蒸馏水等，其中凝固剂是 ,碳源是 ，氮源是 。已知只有能够合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，该培养基属于 培养基。从同化作用类型来看，用该培养基培养的细菌属于( ) 体积小，结构简单，易培养，生活周期短。 方法一：平板划线法 方法二：稀释涂布平板法 核心目的：防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。 定义：梯度稀释、涂布、菌落 将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。 第三步：微生物的恒温培养 二.实验操作 以培养大肠杆菌为例: 制备牛肉膏蛋白胨培养基： 通过培养基的配制说明大肠杆菌（厌氧）的新陈代谢类型是： 异养厌氧型 第一步：制备牛肉膏蛋白胨培养基 1.计 算 2.称 量 3.溶 化：牛肉膏（连同称量纸） 蛋白胨 和氯化钠 琼脂 补加蒸馏水至100ml 4.灭 菌：培养基分装（分装前调PH≈7.6中性或微碱性）后高压蒸汽灭菌；培养皿干热灭菌。 5.倒平板：50℃、酒精灯火焰附近 拔 灭口 开皿、倒培养基、关皿 冷却后倒置 加热 搅拌 加热搅拌 溶解 防止糊底 溶化 例题：关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中，错误的是（　　） 　A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 　B.牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸 　C.待培养基冷却至50℃左右时，进行倒平板 D.待平板冷却凝固约5min～10min后，将平板倒过来放置 　　解析：选A。本题考查了牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备过程。其顺序为：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，故A项错误。 第二步：纯化大肠杆菌 接种 定义：接种环、连续划线、稀释分散、菌落 步骤:1.接种环灼烧灭菌 2.冷却接种环，开棉塞 3.试管口灭菌（灭口） 4.沾取菌液 5.灭口，塞棉塞 6.划线接种 7.接种环灭菌，连续划线五个区域 8.倒置培养 一、平板划线的操作方法 方法二：稀释涂布平板法 步骤:1.稀释操作： 1)试管灭菌编号 2)移液管、稀释菌液 3)重复操作，完成5支试管的稀释 2.涂布平板： 1) 涂布器酒精消毒 2)取菌液 3)燃尽酒精 4)涂布分散菌液 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯 2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种。 倒平板操作 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 问题讨论 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 问题讨论 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧