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应用纪要 比较多个厂家二元超高效液相色谱系统运行长时间缓梯度时的性能 Jennifer Simeone 、Paula Hong和Patricia R. McConville 沃特世公司（美国马萨诸塞州米尔福德） 应用优势 简介 使用ACQUITY™ UPLC™ I-Class PLUS系统 方法开发的最终目标是获得优秀的液相色谱方法，得到可靠且可重现的分析结 改善长时间缓梯度方法的保留时间重现 果。许多因素都会影响方法重现性，包括但不限于：流动相添加剂、pH 、梯度斜 性。 率/时间、温度、色谱柱尺寸、填料粒径和形态，以及色谱柱的再平衡是否适合。 方法稳定性还受LC系统设计的影响。系统设计通常反映为系统或模块的性能规 格，它概述了获得最佳性能的条件。例如，已知对于需要使用长时间缓梯度的方 法或者那些要求单位柱体积的溶剂组成变化较小的方法，使用高压二元泵可以达 到最佳性能。 很多应用都需要使用长时间缓梯度。常见的应用领域包括生物分子分析（尤其是 1 2 3 肽图分析 和游离寡糖分析 ）以及天然产物分析（包括传统中药分析 ）。在本应 用纪要中，我们通过运行通用肽图分析方法比较了三套高压二元LC系统的性能， 并且着重比较了这三套系统的保留时间重现性。理想情况下，在持续数日乃至数 年的分析中（具体取决于分析目的），LC系统应始终能够确保不同进样以及不同 分析之间的性能一致。此次评估将凸显ACQUITY UPLC I-Class PLUS系统与其它 厂家的系统相比，在运行长时间缓梯度方法时的卓越重现性。 沃特世解决方案 ACQUITY UPLC I-Class PLUS系统 Empower™ 3色谱数据软件 ACQUITY UPLC BEH肽分析专用柱 MassPREP™烯醇酶酶解标准品 关键词 长时间缓梯度，二元LC性能，UPLC ， ACQUITY ，Empower 1 应用纪要 实验 样品描述 将Waters MassPREP烯醇酶酶解标准品(P/N: 186002325)复溶于100 µL 0.1%三氟乙酸水溶液中（按照维护和使用手册操作）。当 日制备新鲜样品，制备方法如下：取若干瓶标准品，用流动相A复溶，涡旋混合，然后混合所有样品。将得到的混合样品分别进样 至三套LC系统进行分析。 方法条件 LC条件 LC系统： 厂家A二元UHPLC系统 流速： 0.200 mL/min 厂家B二元UHPLC系统 进样体积： 10 µL 配备CH-A的ACQUITY UPLC I-Class PLUS系统 波长： 214 nm 检测器： 厂家A和厂家B的UHPLC系统使用二极管阵列检 采样速率： 10 Hz