四川籼稻区稻瘟病菌群体遗传结构-植物保护学报.pdf

第３２卷　第１期 植　物　保　护　学　报 Ｖｏｌ．３２　 Ｎｏ．１ ２００５年　 ３ 月 ＡＣＴＡ ＰＨＹＴＯＰＨＹＬＡＣＩＣＡ ＳＩＮＩＣＡ 　Ｍａｒｃｈ　２００５ 四川籼稻区稻瘟病菌群体遗传结构 １ １ ２ １ １ 卢代华　叶慧丽　廖华明　龚学书　周西全 （１．四川省农业科学院植物保护研究所，成都 ６１００６６；２．四川省农业厅植物保护站，成都 ６１００４１） 摘要：应用ｒｅｐＰＣＲ分子指纹技术对２０００～２００２年采自四川６个籼稻自然生态区的１３７个 稻瘟病菌菌株进行了ＤＮＡ分子指纹扩增和聚类分析，共获得７３个不同的ＤＮＡ指纹图谱（单 元型）和６２条分子量不等的ＤＮＡ带型。结果显示，无论以何种遗传相似水平划分，四川稻瘟 病菌的群体结构都表现很突出的优势宗谱，又存在着具有较多遗传多样性的次要小宗谱和特 异性宗谱，蕴含着极其丰富的遗传信息；在０．１９遗传相似水平，所有供试菌株可以划分成３７ 个遗传宗谱，层次较为丰富。四川稻瘟病菌群体结构具有明显的时空特点，不同年度间稻瘟病 菌群体存在一定的亲缘关系，又各自拥有当年的特异性宗谱；在空间上，不同稻作区表现出从 复杂到简单的病菌群体变化特点。稻瘟病菌的遗传宗谱与生理小种致病型不存在一一对应的 关系，作者认为将二者横向比较没有可比性。 关键词：籼稻；稻瘟病菌；群体遗传结构；时空特点；致病型 　　水稻稻瘟病是世界性真菌病害，也是我国水 川籼稻主栽区稻瘟病菌的群体结构和遗传多样性 稻的三大病害之一。四川是籼稻主栽区，面积有 进行分析，探讨稻瘟病菌致病性变化的分子机制， ２ ２００余万 ｈｍ，生态环境复杂，稻瘟病常年发生。 为持久抗瘟性育种提供重要理论依据。 目前生产上应用的品种往往因病菌变异过早丧失 １材料与方法 抗性，其最佳年限一般只能维持 ２～３年左 右［１～２］。要真正解决品种抗性“丧失”的问题，必 １．１稻瘟病菌的收集、分离和培养　供试菌株为 须从病原物着手，全面了解稻瘟病菌群体的结构 ２０００～２００２年在四川不同生态区包括盆西平原、 特征，揭示其遗传变异的本质。长期以来，人们围 盆周边缘、盆东丘陵、盆南丘陵、盆中浅丘、川西南 绕稻瘟病菌生理小种消长与品种抗性丧失等方面 山地等籼稻区采集的穗颈瘟标样，寄主为生产上 作了许多深入研究，但因条件和技术的限制，利用 主栽杂交稻和常规稻品种。标样经灭菌后保湿、 常规方法研究稻瘟病菌的致病性，常受鉴别寄主 分离获得有效单孢菌株，经 ［４］ Ｆｒｉｅｓ 液体培养获得 的生理状态、遗传背景、环境条件和调查者主观因 菌丝体，菌丝体连同滤纸放入６５℃的烘箱中干燥 素的影响，无法对复杂多变的稻瘟病菌群体变化 １２ｈ，然后密封置于４℃冰箱中保存供试。 趋势进行快速、准确的监测，甚至在品种抗性已经 １．２病菌全基因组ＤＮＡ制备和ｒｅｐＰＣＲ扩增　 丧失后，仍不能对病菌致病性变异有统一的认 稻瘟 病 菌 全 基 因组 ＤＮＡ 制 备 方 法 参 照 识［３～４］ ［７］ 。自２０世纪８０年代末以来，一些以ＤＮＡ Ｋａｃｈｒｏｏ（１９９７） 。ＰＣＲ反应体系为２５ Ｌ，０．５ μ 多态性为基础的分子标记技术如 ＭＧＲＲＦＬＰ、 μｍｏｌ／Ｌ的 Ｐｏｔ２