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课题1 菊花的组织培养;什么是细胞分化?细胞分化的原因和结果? 组织培养的过程?以及组织培养的理论基础? 愈伤组织是怎样形成的?有什么特点? 脱分化、再分化? 影响组织培养的因素? 菊花组织培养的过程,及注意的问题? ; 在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构和功能上发生稳定性差异的过程 。;(4)特点:; 当植物细胞脱离了原来所在的植物体的器官或组织而处于离体状态时,在一定的营养物质、激素、和其他外界条件的作用下,发育成完整的植株。 ;课题背景;切取 形成层;课题背景;植物组织培养相关概念;愈伤组织;人参的愈伤组织;菠萝的愈伤组织;(二)、影响植物组织培养的因素; 外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。;(二)影响植物组织培养的因素;MS固体培养基成分及比例;讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?; 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。;常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和赤霉素;植物激素中_______和___________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 _______________、_______________以及___________ 等,都会影响实验结果。 ;生长素;思考:培养基出现的现象反应了什么问题?;4、环境因素:;植物组织培养过程:;植物组织培养的过程;影响植物组织培养的因素;活动2: 用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来? (提示:怎样配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题? );1、实验操作流程;二、实验操作;⑤灭菌;;(2).外植体消毒 ; 不是。对外植体进行表面消毒时,既要考虑到消毒效果,又要考虑到植物的耐受能力。;(3)接种 ;4、接种注意事项;在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境原因:;在培养过程中,是脱分化、再分化的过程,随着芽和根的形成,就具有了自养的能力,是由细胞到一个个体的演变过程;(5).移?? ;固体基质型,含水量高、 蓄水性强、透性好,适合栽培;(6)栽培;思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗?;1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌) 2、外植体的消毒(酒精、氯化汞) 3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯——灼烧) 4、无菌箱中的培养; 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。;2. 是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 3. 是否进行了统计、对照与记录 4. 生根苗的移栽是否合格;;四、课题延伸;本课题内容小结;作业:P36 1、在植物组织培养过程中,为什么要进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。 2、在选取菊花茎段是,为什么要选取生长旺盛的嫩枝?;(四)培养;继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同,在严格的无菌条件下,将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间,培养基中营养物质减少,外植体会分泌有毒物质,造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为1-1.5cm时,就可以进行试管苗培养,否则还需进行第二代继代培养.;1.下列那组符合菊花组织培养的基本步骤( ) A.制备MS培养基→ 外植体消毒→ 接种→ 培养→ 移栽→ 栽培 B.制备MS培养基→ 外植体消毒→ 接种→ 培养→ 栽培→ 移栽 C.制备MS培养基→ 外植体消毒→ 接种→ 栽培→ 培养→ 移栽 D.制备MS培养基→ 外植体消毒→ 接种→ 移栽→ 培养→ 栽培;3.某同学在做菊花组织培养时,操作完成了 3-4天后,观察同一温室中的外植体,发现有的瓶内外植体正常生长,有的瓶内外植体已经死亡,你认为死亡的原因不可能的是( ) A.培养条件,比如pH、温度等不适宜 B.接种时外植体未灭菌 C.接种工具消毒后未冷却就接种外植体 D.将菊花茎段倒插入培养基中 ;5.在植物组织培养过程中,愈伤组织的形成和形态发生是十分关键的一步。而这除需要必备的营养和一些刺激因素外,还需要起诱导作用的物质,其中包括 ( ) A.铜、锌等微量元素 B.细胞分裂素和生长素 C.蔗糖和葡萄糖 D.维生素和氨基酸;21.下图是植物组织培养的简略表示。据此回答: ①;练习2、 基因型为AaBb的水稻(含24条染色体)的花药通过无菌操作接入试管后,在一定条件下形成试管苗,问: (1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团,愈伤组织形成过程中,必须从培养基中获得_____________等营养物质。 (2)要促进花粉
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