超高效液相色谱UPLC课件.pptVIP

4.1 超高效液相色谱的应用 药物分析 如天然产物中复杂组分的分析 生化分析 如蛋白质、多肽、代谢组学等生化样品 食品分析 如食品中农药残留的检测 环境分析 如水中微囊藻毒素的检测 其他 如化妆品中违禁品的检测 高分辨串联质谱QTOF micro 灵敏度高(pg-fg级)和选择性强得到的质谱谱图数据完整、品质高。因而，在天然产物，新药开发，药代研究和蛋白质组学领域的定性、定量分析研究方面占有重要地位。 超高效液相色谱(UPLC)课件 目 录 绪论 1 理论基础 2 仪器介绍 3 应用和展望 4 1.绪论 超高效液相色谱的发展 站在当今世界科技前沿的液相色谱用户现在又有了新的需求。首先是改进生产力的需求，因为大量的样品需要在很短的时间内完成；其次是在生化样品及天然产物样品的分析中，样品的复杂性对分离能力提出了更高的要求；第三是在与质谱等检测技术联用时，也提出了更高的要求。 因此，对液相色谱技术的要求也不断提高，单从技术角度的改进已经不行，或者说必须从理论高度对液相色谱重新认识。由此，UPLC（超高效液相色谱）概念得以提出，将HPLC的极限作为自己的起点。  　　 超高效液相色谱技术的实现，主要是依靠以下几个方面的进步：　　（1）小颗粒、高性能微粒固定相的出现；　　（2）超高压输液泵的使用；　　（3）高速采样速度的灵敏检测器；　　（4）使用低扩散、低交叉污染自动进样器， 配备了针内进样探头和压力辅助进样技术；　　（5）仪器整体系统优化设计：色谱工作站配备了多种软件平台，实现超高效液相分析方法与高效液相分析方法的自动转换。　　 分析速度快 灵敏度高 分离度好 超高效液相色谱的优点 0.00 0.04 0.08 0.12 0.16 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 1. Thiourea - 0.430 2. toluene - 1.034 3. propylbenzene - 1.742 4. butylbenzene - 2.413 5. hexylbenzene - 5.058 样品的组份数：5 5μm颗粒度 完全分离时间：6.00分钟 0.20 0.24 1. Thiourea - 0.046 2. toluene - 0.088 3. propylbenzene - 0.137 4. butylbenzene - 0.182 5. hexylbenzene - 0.360 UPLC? AU 0.00 0.10 0.20 Minutes 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 UPLC? HPLC 样品的组份数：5 1.7μm颗粒度 完全分离的时间：0.60分钟 UPLC的速度提高了！ 增加了样品的通量 0.00 AU 使用1.7μm颗粒度的填料增加灵敏度 可看到更多 的样品信息 AU 0.000 0.004 0.008 0.012 0.016 0.020 Minutes 1.70 1.80 1.90 2.00 2.10 2.20 2.30 2.40 2.50 2.60 1.7 μm AU 0.000 0.010 0.020 0.030 0.040 0.050 Minutes 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 AU 0.000 0.010 0.020 0.030 0.040 0.050 5.0 μm 0.024 恒定柱长时；UPLC?的灵敏度提高1.7倍（170%）！ 恒定L/dp时；UPLC?的灵敏度提高三倍（300%）！ Ultra Performance LC? 速度、灵敏度与分离度的结合 AU 0.000 0.010 0.020 0.030 0.040 0.050 Minutes 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 AU 0.000 0.010 0.020 0.030 0.040 0.050 Minutes 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 15.00 5.0 μm 1.7 μm 60% 更快 30% 更灵敏 70% 更高分离度 在改进获得信息质量的前提下提高分析速度 Ultra Performance LC? 速度、灵敏度与分离度的结合 HPLC 3.5μm UPLC? 1.7μm 对流出时间接近的色谱峰有更好的分离度及更高的灵敏度 生产力：每次实验得到更多信息 A