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Westernblot实验技术详细版;定义:;Western Blot基本原理;Western Blot一般流程;蛋白样品的制备;裂解液;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳;丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺 ??
SDS
配胶的Tris缓冲液
TEMED
过硫酸铵(时间)
Tris-甘氨酸电泳缓冲液
;凝胶浓度与蛋白分离范围;安装玻璃板;转膜;转膜;不能有气泡
不要污染膜的表面
注意正负极
冰浴冷却;半干转;封闭;一抗、二抗孵育;二抗与底物反应显色;Western Blot常见问题分析;SDS电泳;条带比正常的窄?
“微笑”或“倒微笑”条带?;转膜及抗体检测;背景太高;没有阳性条带或比较弱;弥散性条带或非特异性条带;Enjoy Experiment,Enjoy Life
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