邻二氮菲分光光度法测定微量铁(精).pptVIP

邻二氮菲分光光度法测定微量铁 实验目的 学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 掌握TU-1901紫外-可见分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。 根据朗伯－比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。 用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。 实验原理 在pH=2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+： 此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下： 2Fe3++2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+H2O+4H++2Cl- 测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。用邻二氮菲可测定试样中铁的总量。 实验预习 预习邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 了解TU-1901紫外-可见分光光度计的主要构造和使用方法。 TU-1901紫外-可见分光光度计，1 cm吸收池，10 mL 吸量管，50 mL 比色管（或容量瓶） 仪器和试剂 仪器 1.0×10-3 mol·L-1 铁标准溶液：准确称量0.4822 g NH4Fe(SO)4·12H2O于烧杯中，加入80 mL 6 mol·L-1 HCl和少量水，溶解后转移至1 L容量瓶中，以水稀释至标线，摇匀。 100μg·mL-1铁标准溶液: 准确称量0.8634 g NH4Fe(SO)4·12H2O于烧杯中，加入80 mL 6 mol·L-1 HCl和少量水，溶解后转移至1 L容量瓶中，以水稀释至标线，摇匀。 0.15%邻二氮菲水溶液，10%盐酸羟胺溶液（新配），1 mol·L-1乙酸钠溶液，1 mol·L-1 NaOH溶液，6 mol·L-1 HCl（工业盐酸试样） 试剂 1. 启动计算机，打开主机电源开关，启动工作站并初始化仪器。 2. 在工作界面上选择测量项目（光谱扫描，光度测量），本实验选择光谱扫描，设置测量条件（扫描范围，测量波长等）。 3. 将空白放入测量池中，点击START扫描空白，点击ZERO校零。 4. 标准曲线的制作。 基本操作 吸收曲线的绘制和测量波长的选择： 用吸量管吸取2.00 mL1.0×10-3mol.L-1标准溶液，注入50mL比色管中，加入1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，加入2.00 mL0.15%邻二氮菲溶液，5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度。在光度计上用1 cm比色皿，采用试剂溶液为参比溶液，在440-560 nm间，每隔10 nm测量一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的适宜波长。 实验步骤