GB/T 35901-2018猪圆环病毒2型荧光PCR检测方法.pdf

ICS 11.220 B 41 OB 中华人民共和国国家标准 GB/T 35901—2018 猪圆环病毒2型荧光PCR检测方法 Real-time PCR method for detection of porcine circovirus type 2 2018-02-06 发布 2018-09-01 实施 发布 GB/T 35901—2018 ■ r ■ —— 刖 弓 本标准按 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC 181)归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中国农业科学院上海兽医研究所、中华 人民共和国深圳出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、湖南圣湘生物科技有限公司。 本标准主要起草人：张强、李健、熊炜、童光志、赵和平、花群义、李树清、杨忠苹、李国新、王巧全、 王艳、林颖峥、蔡开妹、喻正军、吴绍强、林祥梅。 T GB/T 35901—2018 猪圆环病毒2型荧光PCR检测方法 1范围 本标准规定了猪圆环病毒2型荧光PCR检测的操作方法。 本标准适用于猪圆环病毒2型核酸检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文 件 。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 25172猪常温精液生产与保存技术规范 3缩略语 下列缩略语适用于本文件。 荧光 PCR：荧光聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction) Ct值：每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环数(cycle threshold) DNA：脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid) Tag 酶：Tag DNA 聚合酶(Tag DNA polymerase) TE 缓冲液：Tris-EDTA 缓冲液(Tris-EDTA buffer) PCV：猪圆环病毒(porcine circovirus) 4仪器设备 4.1荧光PCR检测仪。 4.2高速台式冷冻离心机：可控温至4 °C 、离心速度可达12 000 r/min以上。 4.3 普通冰箱：2 °C〜8 °C。 4.4普通冰柜 ：一20°C以下。 4.5超低温冰箱 ：可控温至一70°C以下。 4.6 微量移液器：0.2 #L〜2 yL 、l pL 〜10 mL、10 “L〜100 卩L 、20 “L〜200 卩L 、100 〜1 000 卩L,并 配备与移液器匹配的吸头。 4.7高压灭菌锅。 5耗材 5.1 1.5 mL离心管。 5.2 0.2 mL PCR薄壁管或八联管。 1 GB/T 35901—2018 6试剂 6.1除非另有说明，在检测中使用的试剂均为分析