蛋白质构件--氨基酸.pptVIP

;一、蛋白质的化学组成和分类;;酸水解：H2SO4或HCI能使蛋白质完全水解；不引起消旋作用，但色氨酸完全被破坏，天冬酰胺、谷胺酰胺脱酰胺基； 碱水解：NaOH能使蛋白质完全水解；色氨酸稳定，但大多数氨基酸遭破坏并引起消旋现象； 酶水解：部分水解；不产生消旋，不破坏氨基酸；主要用于蛋白质一级结构分析，如：胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶等。 ;三、氨基酸的一般结构??????????;四、氨基酸的分类;按R基的化学结构： 中性氨基酸 1.脂肪族氨基酸 含羟基或硫的氨基酸 酸性氨基酸及其酰氨 碱性氨基酸 2.芳香族氨基酸 3.杂环族氨基酸;（1）中性氨基酸（5种，甘丙缬亮异） R基均为中性烷基，R基对分子酸碱性影响很小。 Gly是唯一不含手性碳原子的氨基酸，因此不具??光性 。 ; （2） R中含有羟基和硫的氨基酸（共4种，丝苏半甲硫） Cys的R中含巯基（-SH），具有重要性质： 两个Cys的巯基氧化生成二硫键，生成胱氨酸。 Met在生物合成中是一种重要的甲基供体（ ★ ）。 ;（3）酸性氨基酸及其酰胺基团（各2种，天谷酸酰胺） Asp和Glu是唯一在生理条件下带有负电荷的的两个氨基酸； ;（4）碱性氨基酸（2种，赖精脂肪酸） Arg是碱性最强的氨基酸，是动物体内尿素形成的中间物。 ;2.芳香族氨基酸（3种，苯丙色酪香）;3.杂环氨基酸（2种，杂环带组脯）;;1.非极性R基氨基酸（8种）;2.不带电荷的极性R基氨基酸（7种）;3.带负电荷的R基氨基酸（酸性氨基酸，2种）;4.带正电荷的R基氨基酸（碱性氨基酸，3种）;（二）不常见的蛋白质氨基酸;;（三）非蛋白质氨基酸;（一）氨基酸的解离;氨基酸的分部解离 ;（二）氨基酸的等电点;;;例1：计算天冬氨酸的等电点pI 解：根据等电点的定义，近似求出 pI=（pKa1+ pKR)/2=(2.09+3.86)/2=2.97;（一）α-羧基参加的反应 1. 成酯反应 羧基被醇酯化后，形成相应的酯。 2. 成酰氯反应 羧基可与五氯化磷或二氯亚砜反应，生成酰氯，在多肽的人工合成中常用。 3. 成酰胺反应;1. 酰化反应 丹磺酰氯（5—二甲基氨基萘-1-磺酰氯， DNS-Cl ）： 常用于多肽链－NH2末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定。;; 2. 烃基化反应 α-氨基中的氮是一个亲核中心，能与烃基（包 括环烃及其衍生物）发生亲核取代反应，如Edman 反应（可鉴定多肽的NH2末端氨基酸 ）。;;（三）茚三酮反应 与茚三酮反应（★） 茚三酮在弱酸中与α-氨基酸共热，引起氨基酸的氧化脱氨、脱羧反应，最后，茚三酮与反应产物——氨和还原茚三酮反应，生成紫色物质。 ; 用纸层析和柱层析把各种氨基酸分开后，用茚三酮显色可以定性鉴定，并在570nm定量测定各种氨基酸。 Pro、Hy-Pro与茚三酮直接形成黄色化合物。;（四）? 侧链官能团的特异反应—用于蛋白质的化学修饰 氨基酸侧链含有羟基、酚基、巯基、吲哚基、咪唑基、胍基、甲硫基等。 蛋白质的化学修饰：在温和条件下，以可控制的方式使蛋白质与某种试剂发生特异反应，引起蛋白质中个别氨基酸侧链或功能团发生共价化学改变。 ;七、氨基酸的旋光性和光谱性质;除了苏、异亮有四种光学异构体,甘氨酸只为L型外，其余17种氨基酸有两种光学异构体：L型、D型。构成蛋白质的氨基酸均属L-型。 ;;;（二)氨基酸的光谱性质;知识链接;;分配原理 固定相和流动相； 混合物在层析系统中的分离决定于该混合物组分在两相中的分配情况； 分配系数； 固—液、液—液、气—液； ;（一）分配层析法： ;基于分配系数差异的分离方法—分配层析;1、柱层析 层析柱中的填充剂或支持剂表面附着一层结合水作为固定相，沿固定相流过的与它互不相溶的溶剂是流动相。当用洗脱剂洗脱时，柱上端的氨基酸混合物在两相之间会按不同的分配系数以不同的速度向下移动。分部收集层析柱下端的洗脱液，然后分别用茚三酮显色定量，以氨基酸量对洗脱液体积作图得洗脱曲线，曲线中的每个峰相当于某一种氨基酸。;2、纸层析 固定相：滤纸纤维素上吸附的水 流动相：展层用的溶剂 层析时，混合氨基酸在这两相中不断分配，使它