卵磷脂胆固醇酰基转移酶基因单核苷酸多态性与冠心病易感性的关联研究-遗传学专业论文.docxVIP

卵磷脂胆西醇酰蒸转移酶基因单核苷酸多态性与冠心瘸易感性的关联研究 卵磷脂胆西醇酰蒸转移酶基因单核苷酸多态性 与冠心瘸易感性的关联研究 (孛文攮要) 导师：张番俸研究甓 研究嫩：张克兰硕士 瓣姨勰辣鬻嚣餮纯性心薤襄≤篱称嚣心襞，coronary artery disease，c矗秘是一静威胁人体健康的重蘩瓣滚瘸，其发病率窥张亡率 逐年。b升。流行病学调赢髓零冠心痛与多种滤传因素有关，尤藏熄黪与 脂代谢的多个基因在冠心瘸的发生发展中起糟熬要作用，这是因为瓶脂 紊魏建导致冠惑瘸发生发爨瘾理演交麴必要魏提。在碡翼动物串，隳臻 穗鼹瓣孵蠛基簧蓼蘸leci穗in：cholesterol acyltransferase， LCAT)戆腿圃醇逆向转斌潮肝代谢的关键酶，黔垮维持血浆胆网黼的椽 态平衡，调节高密度脂骚自(high density lipoprotein HDL)瓣膜蛋 白代谢，其有抗动脉粥榉硬化功能，是CAD鹣器惑蒸因之一。 麓饕人类萋蠢疆溅掺酶宠或，骚究与庆瘸表燮援关静垮剜嶷舞基 成为暇学遣传学的一个擞骤课藤。单棱苷酸瘳淼(single—nuoleotide polymorphism，SNP)作为第兰代遗传标记。鼎有数量大，分稚广的特 点。黎统趣在辫体承平上筛套婆定SNP，特剩悬编玛区和基因调搜送鲍 裁p，并遇过瘸爨一霹爨缀瓣熬院较囊统计学势辑，毒毒夔获褥与痰瘾穆 关袋鹣SNP位点或攀傣型。邀对于阐嗫蒸氅簸杂鹣多基霞疾瘾的滤健梳 理具榭激要意义。 本课题通过对中鞠汉族CAD患者和正常个体中LCAT基因以知cSNP 本课题通过对中鞠汉族CAD患者和正常个体中LCAT基因以知cSNP 懿磷突帮未氧cSNP戆撵逡，凌较这些cSNP焱患考察歪豢怼爨久瓣孛豹 分布，揭示LCAT基因cSNP与脂代谢紊奔L及麓心病的关系，以嬲阐明其 在CAD发生发展中的作用。 蒋先，我{fj采用聚合酶链反应一隈铡性片断长发多态槛 (polymerase chain reaction—restriction fragment length polymorphism，PCR—RFLP)方法研究了我阑正常人和CAD患者中3个已 知cSNP位点(608CT，91 ITC和1188CT)的分布频率，并初步探讨 它们与脂代谢和冠心痛蠹q关系；其次，运用DHPLC技术筛蠢LCAT基因 终鼹予区域寒翔豹cSNP，遴一多逶过测廖窥PCR一疆p方法验诞矮，怼 这熬cSNP与脂代谢和CAD的裙关往进行了统诗学分耩。 对3个已知cSNP位点的研究结果暇示，在中国人群巾仪存在 608CT多态位点。在对照组中，两种等饺溅因的频率分别为97．13％ (608C)纛2。87舞(608薯，嚣在CAD惠豢缀孛蔻9§。26％(608C)蠢 0．74％(608 T)，等位蒸瓣獭率分布符合Hardy-Weinberg平衡。经卡方 检验，该位点等位基因(尸=0．034)和基因型频率(尸=0．032)分布 在对照组和患者组间燕黪髭著，CAD组608T频率显著低于对照组，提 示LCAT基毽豹608CT多悫经点可能与CAD糖关。扶患者缎血麟水乎豹 交识采蓉，寿608T瓣HDL-C承平显著麓予无608T懿褰餐(尸= 0．015)，表明608T等能基因与CAD患者较瀚的血浆HDL-C水平相关 联。 远羯PCR-DHPLC、DNA浏序襄RF驴方法发现T 1个薪靛cSNP，帮 位于第疆岁}显子戆511CT(P143L)，在190爨CAD患者串菸硷雄了11 个杂含子，但未见纯含予。在患者组中的蒸躐型和等位基因频率分别为 2 ?瞒稻2。麟，等佼纂嚣簇率努毒籍会ltardy-Weinberg孚鬻。与藏嚣 ?瞒稻2。麟，等佼纂嚣簇率努毒籍会ltardy-Weinberg孚鬻。与藏嚣 辩，在209弼对照中没存梭鑫上述多态。避一箩将患者盔按HDL-C承乎 正常岛否分为HDL代谢綮乱亚组(LHDL，low HDL—C level，波现为 HDL-C降低)和HDL代谢正常亚组(NHDL，normal HDL-C leve]．)。经卡 方检验，患者组串该接点等盈基嚣及基因溅籁率不莰在LHDL鞍N辑随秀 蚕缀缮褥，莠墓在两羲组蕊男茬蓠毒羹萋豫差其，两盈通过logister 簸能圆好分析，51IT猩CAD两囊组和两溉缀男性闻与HDL代谢紊乱有 黄姓箸性相关，其Odds-Ratios(ors)[95％可信区间]分别为5．754 [1．893—13．78翻和7，003 E2．243-21。8593。淡碉51ICT(P143L)这一 裁浆多态鑫瘴与CAD臻黉审HDL霞嚣紊蘸鹾馨榷关。 除此之外，我们弼发瑗了3个新的cSNP，即位于第一外盛子的 52TA(L-llQ)、第穴外显子的1230AG($383G)和127BCT (R399