缓解体力疲劳功能评价方法.docVIP

. . 缓解体力疲劳功能 试验项目、试验原则及结果判定 1. 实验项目 1.1 动物实验 1.1.1动物体重 1.1.2 负重游泳实验 1.1.3 力竭实验 1.2人体试食试验 1.2.1 临床症状与体征 1.2.2 跑台试验 2 试验原则 2.1 动物实验所列指标均为必做项目，动物负重游泳和力竭实验前，对实验动物进行运动能力筛选。 2.2 实验前必须对同批受试样品进行违禁药物的检测。 2.3 运动实验与生化指标检测相结合。 2.4 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。 2.5 停止给予受试物一天后进行效果观察。 3 结果判定 3.1 动物实验： 负重游泳实验结果阳性，力竭实验结果为阴性（特指无显著不利影响），可判定该受试样品缓解体力疲劳功能的动物实验结果为阳性。 3.2 人体试食试验： （1）试食前后，受试组自身对照，肌酐、转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶无不利的显著性改变； （2）跑台试验：试食组自身对照，试食后运动时间与试食前相比显著性增加，首次试食后运动时间与试食前相比无显著性差异。 满足（1）和（2）可判定该受试样品具有缓解体力疲劳的功能。 缓解体力疲劳功能评价方法 1. 动物实验 1.1 原理 在一定时间内给予一定量的受试样品，通过持续服用，调整特定人群机体状态，使其拥有更好的调节功能，该功能包括应对潜在需求、使机体处于良好状态，具有更长时间作业能力或在相同作业时间内不出现更重的疲劳表现。 1.2 负重游泳实验 1.2.1 仪器与器材 游泳箱（大小约80cm×50cm×60cm），电子天平、铅皮。 1.2.2 实验方法 1.2.2.1 实验动物推荐使用雄性小鼠，6周龄，体重20-24g。 1.2.2.2 剂量分组及受试样品给予时间 实验设三个剂量组和一个阴性对照组，一个空白对照组，一个单次中剂量受试组。其中以人体推荐量的10倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。阴性对照组灌胃给予安慰剂。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。 1.2.2.3 实验步骤 末次给受试样品24小时后，将尾根部负荷6%体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。水深不少于40cm，水温30℃±2.0℃，记录小鼠自游泳开始至力竭时间，即小鼠负重游泳时间。力竭判断标准为：小鼠沉入水中超过10秒，且放在平面上无法完成翻正反射。 1.2.3 数据处理及结果判定 游泳时间为计量资料，采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。 （1）受试样品组负重游泳时间明显长于阴性对照组和空白对照组，且差异有显著性； （2）单次中剂量组与阴性对照组相比，负重游泳时间无显著差异。 同时满足（1）和（2）时，可判定该实验结果阳性。 1.3 力竭实验 1.3.1仪器与器材 全自动生化仪，游泳箱，电子天平、铅皮。 1.3.2 实验方法 1.3.2.1 实验动物 雄性SD大鼠，体重160-200g。 1.3.2.2 剂量设计和分组 大鼠以人体推荐量的5倍为基本剂量。其余同1.2.2.2。 1.3.2.3 实验步骤 末次给受试样品24小时后，采用尾部负重3%体重铅皮的大鼠置于游泳箱中游泳。水深不少于50cm，水温31℃±1.0℃，当大鼠游至连续3次没入水底，每次超过10秒，视为力竭。记录大鼠自游泳开始至力竭时间，大鼠腹主动脉采血全血，置4℃冰箱约3h，血凝固后2000rpm离心15min，取血清备用，测定尿素氮、肌酐、转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性。 1.3.3 数据处理及结果判定 血液生化数据为计量资料，可用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。 （1）受试样品组与阴性对照组和空白对照组相比，血清尿素氮、肌酐、转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性应无显著性差异； （2）单次中剂量组与阴性对照组相比，血清尿素氮、肌酐、转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性应无显著性差异； 同时满足（1）和（2）时，可判定该实验结果阴性（特指无显著不利影响）。 1.4 注意事项 1.4.1 每一游泳箱一次放入动物不宜