高效液相色谱仪使用与操作规程（学生用).pptVIP

谢 谢！ 放映结束 感谢各位观看！ 让我们共同进步 * 高效液相操作通用规程 一、操作程序 1、开机前准备 1.1 检查桌面是否清洁、整齐。 1.2检查设备是否清洁，连接管线是否正常，色谱柱是否需要更换。 1.3检查电源线有无破损。 1.4接通电源，检查插座上各插孔的指示灯是否显示正常。 1.5准备好超声过的流动相和流路冲洗溶剂。 2、开机 2.1 撤下设备停用卡，换上设备运行卡。 2.2 运行检查，打开仪器各部件开关，待机器自检，核实无异常。 2.3 拧松泵右方的快速冲阀（大约2圈左右），按泵前面板右下方的“purge”键 排气泡约2至5分钟左右后，再按“purge”键停止。然后，拧紧快速冲洗 阀。 2.4 打开电脑，并打开软件。 2.5 用色谱纯的甲醇或乙腈冲洗流路约20分钟左右。若流动相中有盐或酸，再 用95%水（加5%甲醇）冲洗约20分钟。 2.6 换上流动相冲洗流路，待基线和压力稳定后，开始分析样品。 2.7 样品分析完后，处理数据。 2.8 若流动相中有缓冲盐或酸，用95%水冲洗60分钟左右。 2.9 换上甲醇冲洗流路约30分钟。 3、关机 3.1 关闭仪器各部件上的电源开关,并闭电脑。 3.2 拔掉机器电源插头。 4、安全及操作注意事项 4.1 流动相冲洗用的水，必须是重蒸水或2次蒸馏水，并用微孔滤膜过滤，而且要定期更换，防止长细菌堵塞仪器管路。建议每周至少更换两次。 4.2 操作有机溶剂时一律戴一次性手套。 4.3 流动相中有盐或酸时，在流动相冲洗前后一定要用水冲洗流路，防止柱效下 降、堵塞或柱塌陷。 4.4 仪器使用前后一定要用甲醇或乙腈冲洗流路，平衡色谱柱，赶走管路中的杂质和水分。 4.5 流动相禁止使用氯仿、三氯（代）苯、亚甲基氯、四氢呋喃、甲苯等；慎重 使用四氯化碳、乙醚、异丙醚、酮、甲基环己胺等，以免造成对柱塞密封圈 的腐蚀。 4.6 仪器长期不用时，应用甲醇冲洗各流路。 4.7 检测器的紫外或可见灯在开的情况下，一定要保证有液相流经检测池。若不 需要做样，可设置一个较低的流速（如0.05ml/min）。 5、清洁程序 5.1 停机并切断机器电源。 5.2 松开仪器上各活动面板，用无水酒精定期插洗仪器表面的灰尘和污垢。 5.3 定期更换溶剂瓶中的溶剂过滤头。 5.4 用干净、无纤维抹布擦拭机器，使机体表面光亮清洁，无污迹水渍，机身各 部位无污物残留。 5.5 定期更换蠕动泵头溶剂瓶中的95%水。建议每周至少更换两次。 * * → * * 突然容易 * 突然容易 * 突然容易 * 突然容易 * 突然容易 * 突然容易 * 突然容易 * 突然容易 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 高效液相色谱仪使用与操作规程 ??Agilent 1100 HPLC 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 第一步 第二步 第三步 第四步 准备 开 机 注意 事项 清洁 关机 步 骤 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 Agilent1100系统组成 本系统由溶剂输送泵（四元泵，标配真空脱气机） Rheodyne 7725i手动进样阀 柱温箱 VWD紫外-可见检测器 Agilent1100色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 第一步、准 备 1 、准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。 2 、根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。 3、 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。（注意腐蚀性与有机系的的溶剂） 4 、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 接通电源，依次开启不间断电源、真空脱气机、四元泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。 第二步、开 机 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 一）参数设定 1、 波长设定： 2 、流速设定： 3 、流动相比例设定： 4、 梯度设定： 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 二）更换流动相并排气泡 1： 将吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中； 2 ：顺时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀； 3 ：运行泵，泵以3ml/min的流速冲洗5min（可设定）后泵流速设为0ml/min； 4 ：将排液阀逆时针旋转适度拧紧，关闭排液阀。 5 ：如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 三）平衡系统