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检验科科室工作流程(工作前准备) 单试剂与双试剂的比较 时间 吸光度 A 1 A ’ 1 时间 吸光度 A 1 A ’ 1 S+R1 S+R1 R2 A 2 A ’ 2 —:表示正常颜色样本反应曲线;—:表示样本本底颜色高的标本 * ppt课件 检验科科室工作流程(工作前准备) 单试剂与双试剂的比较 ALT α-酮戊二酸+L-丙氨酸 L-谷氨酸+丙酮酸 LDH 丙酮酸+NADH+H L-乳酸+NAD 原理: 试剂成分: R1:Tris缓冲液 L-丙氨酸 NADH LDH R2:Tris缓冲液 L-丙氨酸 a-酮戊二酸 * ppt课件 检验科科室工作流程(工作前准备) 使 用 双 试 剂的优点 扣除样本空白的影响(R1多为缓冲液,R2多为启动试剂) 去除内源性干扰物质(R1含与内源性干扰物质反应的物质,R2为启动试剂) 使用方便,不易造成浪费 * ppt课件 检验科科室工作流程(工作前准备) 使 用 双 波 长 的 优 点 λ波长 吸光度 λ1 λ2 主波长 付波长 A’ 1 A’ 2 A 1 A 2 1、使用单波长λ1测定时,待测物的吸光度A为: A=A1+A’1 2、使用双波长测定时,待测物的吸光度A为: A=(A1+A’1)-(A2+A’2) —:待测物的吸收曲线;—:干扰物的吸收曲线 * ppt课件 检验科科室工作流程(工作前准备) 使 用 双 波 长 的 优 点 1、补偿由于样本溶血、黄疸、脂血造成的样本本底颜色增高的影响; 2、补偿由于电压波动造成的影响。 * ppt课件 朝会交接工作 接收标本整理分类 样本前处理准备 工作前准备 上机测定 结果审核 上级主管 报告发出 填写记录 维护保养 关机 异常告知 复查 检验科科室工作流程(上机测定) * ppt课件 朗伯--比尔定律(Lamber-Beer定律) 比色分析的基础 入射光Ⅰ0 出射光Ⅰt L 当一束强度为Ⅰ0的平行单色光通过一个含有浓度为C的吸收物质、厚度为L的吸收池时,一些光子被物质吸收,光强从Ⅰ0减少至Ⅰt。经数学推导,可用以下数学公式表示: -lg— =ε ×C×L Ⅰt Ⅰ0 * ppt课件 -lg— =ε ×C×L Ⅰt Ⅰ0 朗伯--比尔定律(Lamber-Beer定律) 比色分析的基础 — Ⅰt Ⅰ0 用T表示,称为透光率。-lg—用A表示,称为吸光度。 ε是摩尔消光系数,在给定条件(单色光波长、溶剂、温度), ε是物质的特性常数,它只和该物质分子在基态和激发态的跃迁几率有关。在A与C或L之间的直线关系中, ε是斜率,值越大,测定的灵敏度越高。 Ⅰt Ⅰ0 A =ε ×C×L * ppt课件 检验科科室工作流程(上机测定) 分 析 方 法 简 介 时间 吸光度 A 1 t 终点法 时间 吸光度 A 1 t 速率法 t2 t1 t3 t4 △A1 △A2 △A3 S+R S+R 利用反应到达终点时的吸光度A1来计算物质浓度。 利用0级反应期,用最小二乘法计算出单位时间的吸光度变化△A/min,来反应酶的活性。 * ppt课件 检验科科室工作流程(上机测定) 酶 测 定 简 介 酶是生物体内具有催化活性的一类蛋白质,具有高效性和专一性。 例: 酶 葡萄糖+B C+D 测量对象不同: 1、葡萄糖是待测物,B和酶是试剂,充分反应后,测定B的减少量或C、D的生成量,就可以反映葡萄糖的浓度。 2、酶是待测物,葡萄糖和B是试剂,测定葡萄糖、B减少的速度或测定C、D生成的速度,就可以反应酶的活性。 表示单位不同: 1、酶以活性单位表示,如国际单位IU/L 2、其他项目,多使用物质的量作为单位:如国际单位mmol/L(国内多用)或常用单位mg/dl(日本多用) * ppt课件 检验科科室工作流程(上机测定) 标 本 测 定 物 质 分 类 酶:ALT、AST、ALP、GGT、CHE、LDH、CK、CK-MB、HBDH、LDH1 蛋白:TP、ALB、U-TP、U-ALB、PA 糖类、小分子:GLU、BUN、CRE、UA 离子:K、Na、Cl、Ca、Mg、P 脂类:TCHO、TG、HDL、LDL、Apo1、ApoB、Lp(a) * ppt课件 检验科科室工作流程(上机测定) 上 机 测 定 的 流 程 质控品测定 检查操作,新开一瓶质控血清 在
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