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一、背景知识二、试验原理三、试验结果四、临床应用 试验有五种成分参与反应,分属三个系统: 1. 检测系统:已知抗原(或抗体)与待测抗体(或抗原)(用已知抗原检测未知抗体或用已知抗体检测未知抗原。 ) 2. 指示系统:绵羊红细胞与相应溶血素(试验时常将其预先结合,成为致敏绵羊红细胞) 3. 补体系统:(补体的作用无特异性,既能与检测系统中的抗原抗体复合物结合,也能与致敏绵羊红细胞结合) 检测系统 指示系统 补体系统 补体系统 反应分两阶段进行: 第一阶段 先加入检测系统及补体,让其有优先结合的机会。 第二阶段 加入致敏绵羊红细胞,检测补体的存在与否。 反应不发生溶血,证明待测物存在,试验结果阳性。 反应发生溶血,证明待测物不存在,试验结果阴性。 补体结合试验最早应用于梅毒的检测。 补体结合试验曾广泛的应用于临床微生物学检验中,比如:细菌、病毒、衣原体、立克次体等微生物所致疾病的血清学诊断。 在对SARS的诊断中,补体结合试验的灵敏度要高于直接做病毒的分离培养。 1.为什么要设计指示系统? 2.如果将反应步骤颠倒,先加指示系统与补体,再加检测系统,结果将怎样? 一、背景知识 二、试验原理 三、试验结果 四、临床应用 “complement fixation test”相关网站: /medicine/rensou3.htm * * * * * * 图1 抗原(antigen Ag)与抗体(antibody Ab)结合形成免疫复合物(immune complex IC) 图2 免疫复合物与补体结合,使补体发生作用,失去活性。 Ag Ag Ag Ag 图1 图2 返回 Ab 补体(complement) SRBC 图1 绵羊红细胞与溶血素(hemolysin)即抗绵羊红细胞结合,形成致敏绵羊红细胞(SRBCs)。 图2 致敏绵羊红细胞与补体结合,使其激活,补体发生溶细胞作用,引起红细胞肿胀,发生溶血。 图1 图2 返回 SRBC SRBC 补体(complement) SRBC SRBC hemolysin SRBCs SRBCs Ag Ag Ab 未知 未知 不存在 未生成 Ag 检测系统 已知 已知 SRBC SRBC hemolysin SRBCs 请思考指示系统的作用 SRBC SRBC SRBC complement SRBCs Ag Ag complement Ag Ag SRBC SRBC SRBCs 无溶血现象 Ag SRBC 在反应的第一阶段,抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物,抗原抗体复合物与补体结合。 在反应的第二阶段,没有游离补体,致敏绵羊红细胞不溶解,不发生溶血现象。 在反应的第一阶段,抗原没有与抗体结合,没有形成抗原抗体复合物,反应液中有游离补体存在。 在反应的第二阶段,补体与致敏绵羊红细胞结合,使其溶解,发生溶血现象。 SRBC SRBC 待测物存在 待测物不存在 溶 血 溶 血 1.为什么要设计指示系统? 2.如果将反应步骤颠倒,先加指示系统与补体,再加检测系统,结果将怎样?
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