高中-生物实验总结63025.docVIP

PAGE19 / NUMPAGES20 高中生物实验总结 实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布 1.实验原理： 利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布；甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同： 甲基绿+DNA→绿色 吡罗红+RNA→红色2.分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中； 线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA； RNA主要分布在细胞质中。 3.实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 4.实验结论：DNA主要分布在细胞核中；RNA主要分布在细胞质中； 5.实验流程： （1）取口腔上皮细胞制片：①载玻片上滴一滴质量分数为：0.9%NaCl溶液； ②漱口后，用消毒牙签刮口腔内壁后放在载玻片的液滴中涂抹几下； ③载玻片在酒精灯上烘干，盖上； （2）水解：①载玻片放入盛有30ml质量分数为8%的HCl的小烧杯中； ②大烧杯中加入30℃温水； ③将小烧杯放入大烧杯中保温5min； （3）冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s; （4）染色：①吸水纸吸去载玻片的水分； ②滴两滴混合染液，染色5min； ③吸去多余的染液，盖上盖玻片； （5）观察：先低倍后高倍； 6、几种液体在实验中的作用： （1）0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮的正常形态。 8%的HCl：①改变细胞膜等的通透性； ②使染色质中的DNA与蛋白质分开。 蒸馏水：配置染液；冲洗载玻片。 （2）混合染液需要现配现用； （3）该实验不宜用深色的材料，避免颜色对实验的干扰。 实验二、 物质鉴定 一、实验原理：还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀（水浴加热） 脂 肪 + 苏丹III ～橘黄色 （滴液观察或制片显微镜观察）脂 肪 + 苏丹IV～ 红色 蛋白质 + 双缩脲试剂 ～紫色反应 （不加热） 1、还原糖的检测 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如：苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。 （3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色）  操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 ? ? 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂； ? 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70~ 900C下分解成黑色CuO和水； 甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu OH生成。 4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。 防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； ? 缩短实验时间。 ★模拟尿糖的检测 1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 3、结果：试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。 4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。 2、脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤： 制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央  ↓  染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）  ↓  制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）  ↓  镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒） 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用