高压氧对蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤的作用机制研究外科学神经外科专业论文.docxVIP

博士学位论文高压氧对蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤 博士学位论文 高压氧对蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤 的作用机制研究 博士研究生：刘昊 一丫趔剿㈣Ⅷ00帅帅㈣㈣㈣m洲 指导老师：马廉亭教授 摘要 蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage，SAH)是一种严重的脑血管疾 病，致死致残率较高，严重威胁着患者生命健康。早期的研究认为SAH导致的迟 发性血管痉挛可能是患者致死致残的主要原因。最近一项多中心的双盲临床试验 研究表明，一种新的内皮素受体拮抗剂Clazosentan，能使颅内大血管痉挛程度 明显减轻，却没有显著改善神经功能预后，减少患者死亡，这些结果提示可能存 在除了颅内血管痉挛以外的其它需要评估的脑损伤机制。目前有一系列的证据表 明，炎症反应在蛛网膜下腔出血后神经功能损伤中起着重要的作用，并与患者的 预后呈负相关。最近几年有研究学者提出了早期脑损伤(early brain injury， EBI)这一新概念，文献中将其定义为SAH后72小时内出现的的急性神经系统损 伤，包括急性颅内压增高、脑水肿、血脑屏障破坏、神经功能障碍等。目前己在 动物实验及临床研究中证明，免疫炎症反应在SAH后的EBI中起着关键作用，而 对于免疫炎症反应信号通路的抑制可能成为SAH患者潜在的治疗靶点。 TOLL样受体(tol i-I ike receptors，TLRs)是天然免疫及机体的模式识别受 体(pattern recognition receptors，PRR)之一，在炎症反应和固有免疫中起着 关键性的作用。目前己经有12种TLRs(TLRl-TLRl2)在人类被发现，有研究表 明Toll样受体4(toll-Iike receptor 4，TLR4)在脑卒中、阿尔茨海默病、亨 延顿舞蹈病及帕金森病的免疫炎症反应中起着重要作用。近期有文献报道SAH后 早期TLR4／NF—K B信号通路被激活，并在炎症反应中起着重要作用，而抑制该 通路则可明显减少肿瘤坏死因子一Q(tumor necrosis factor-Q，TNF-Q)、白 介素一6(interleukin一6，IL-6)，白介素-1 B(interleukin一1 B，IL一1 B)和细胞间 粘附分子一1(intercelluar adhesion molecule—l，ICAM一1)的释放，改善神经功 能障碍并减轻脑损伤，因此TLR4／NF-K B信号通路可能是蛛网膜下腔出血后早期 脑损伤潜在的治疗靶点。 高压氧是一种非侵入性的物理疗法，目前被广泛应用于颅脑损伤、脑血管病 后神经功能损害的脑复苏、脑缺血、急性一氧化碳中毒、潜水减压病的治疗，明 万方数据 摘 摘 要 显降低了患者的致死致残率。由于高压氧具有抗炎和抗氧化的特性，国外有学者 认为高压氧可以用于SAH后颅内血管痉挛的辅助治疗，但是目前还不清楚高压氧 治疗能否减少蛛网膜下腔出血后炎性因子的释放进而减轻早期脑损伤，缺乏相关 的生理学及分子生物学研究证据。 近期有一系列的研究表明在脊髓损伤和多脏器衰竭动物模型上，高压氧能通 过抑制TLR4／NF-K B信号通路来减轻炎症反应并减少组织损伤，因此通过高压氧 的这种抗炎机制来减轻SAH后早期脑损伤，可能是一个新的治疗思路和方向。本 课题拟通过视交叉前池一次注血的方法建造大鼠SAH后EBI模型，并使用高压氧 治疗进行干预，来评估TLR4／NF—K B信号通路及下游炎性细胞因子的改变，分析 高压氧治疗对于蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤的影响，以期为蛛网膜下腔出血 的临床治疗提供新策略。 第一部分高压氧对蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤的神经保护作用 目的：通过视交叉前池一次注血的方法来建立能够模拟SAH后EBI的动物模 型，并探讨高压氧治疗对大鼠SAH后EBI是否具有神经保护作用。 方法：150只健康成年雄性Sprague—Dawley(SD)大鼠随机分为5组，即标 准对照组(the sham group，SH，n=30)，高压氧对照组(the sham+2．8 atmospheres absolute HBO group，SH+2．8ATA，n=30)，蛛网膜下腔出血组(the SAH group， SAH，n=30)，2．0个标准气压治疗组(the SAH+2．0 atmospheres absolute HBO group，SAH+2．OATA，n=30)和2．8个标准气压治疗组(the SAH+2．8 atmospheres absolute HBO group，SAH+2．8ATA，n=30)。应用视交叉前池一次注血法制成SAH 后EBI模型，在术后12h将大鼠放入高压氧舱内进行高压氧治疗，加压时间为 l 5min，当舱内压力达到2．0或2．8个绝对大气压(atmo