肾虚血瘀证老年痴呆树鼩复合模型的初步建立与田七益智颗粒方药效评价药理学专业论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 一般体质形态特征变化以及比较脏器指数体现动物模型的表证情况；采 一般体质形态特征变化以及比较脏器指数体现动物模型的表证情况；采 用化学发光法测定血浆FT3、FT4、E2、T的含量变化；血液流变仪分别 测定全血高切、全血中切I、全血低切I、全血低切II的粘度、血浆粘 度、红细胞压积高切还原粘度、中切还原粘度、低切还原粘度、卡松粘 度、卡松屈服应力、以及纤维蛋白原。 肾虚血瘀证老年痴呆树嗣动物模型的初步建立与药效评价：将正常 饲养的雄性树驹随机分为4组，每组15只：空白组、老年性痴呆病组(以 下简称AD组)、肾虚血瘀证老年痴呆病组(以下简称病证结合组)、 田七益智颗粒方药效评价组(以下简称给药组)。AD病组、病证结合组、 给药组分别脑室双侧注射A1323．35和IBO的混合液，制备老年痴呆树铜模 型。脑部注射伤口愈合后，病证结合组、给药组在第1—3天腹腔注射氢化 可的松lmg／1009，第4-6天皮下注射肾上腺素O．1mg／1009；第7天开始 对给药组灌胃给予田七益智方药液lml／1009．d，连续10天；空白组注射 等量的生理盐水。通过观察记录树晌体质质量及一般状态；高压液相色 谱法测定脑组织去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5一羟色胺(5．HT) 的含量；western blot检测脑组织Ap、APP和磷酸化tau蛋白的表达；HE 染色法检测树嗣海马区脑组织病理形态变化以及乙酰胆碱转移酶 (Chat)、免疫组化法检测脑内突触素(sYP、)的活性；血凝仪测定凝血四 项指标；采用化学发光法测定树鼠句血清中FT3、FT4、E2、T、CORT的含 量变化。 结果： 由于树嗣怕水不会游泳的特性，本课题以Morris水迷宫基础上的对 树鼠句行为学检测的探索结果均无差异性，没有统计学意义。故暂未探索 出适合检测树嗣行为学的方法。高效液相色谱仪检测结果显示，与空白 组对比，模型组树嗣脑组织单胺类递质去甲。肾上腺素的含量有所减少， 1．92％D一半乳糖组、Ap23．35+IBO 10ug／ml组有显著差异(P0．05)。经 western blot检测分析，各模型组Ap23．35、APP、磷酸化一tau(P—tau)的条 万方数据 带颜色均比空白组加深增多，其中以1．92％D．半乳糖组、Ap23—35；+IBO 带颜色均比空白组加深增多，其中以1．92％D．半乳糖组、Ap23—35；+IBO (1 0ug+5ug)组最为明显，统计分析有显著性差异(氏O．05)；D一半乳糖造 模组、A1323．35；+IBO造模组中，同组之间的高剂量与低剂量比较，具有显 著性差异(氏O．05)。HE染色病理切片结果显示空白组未见病理形态改 变，镜下神经元细胞结构完整，细胞未见变形、固缩等改变；两组造模 组的低剂量可见海马区神经元细胞形态发生改变，核固缩成不规则形三 角形，胞浆、胞核界限不明显，细胞变得稀疏，锥体细胞变小、缺失； 而高剂量组海马区神经元细胞变性坏死程度呈加重趋势，细胞周围间隙 过大，排列紊乱，锥体细胞变小、缺失，死亡。免疫组化染色结果显示， 空白组有较多的Chat免疫阳性神经元细胞和SYP免疫阳性神经元细胞， 细胞胞体较大且排列紧密，多为圆形或椭圆形；造模低剂量组则Chat免 疫阳性神经元数量明显减少，胞体缩小，出现核固缩，排列较松散；造 模高剂量组的Chat免疫阳性神经元和SYP免疫阳性神经元细胞形状严重 变形，数量较少，且神经元细胞破裂，缺失。造模组组海马区SYP免疫 阳性神经元细胞平均截面积、平均光密度和Chat免疫阳性细胞平均截面 积、平均光密度均有所下降；与空白组比较，造模组海马区SYP免疫阳 性神经元细胞平均截面积和Chat免疫阳性神经元细胞平均截面积均有显 著性差异(PO．0 1)，SYP免疫阳性神经元细胞平均光密度有显著性差异 (PO．01)。 肾虚血瘀证模型：与空白组比较，造模组精神萎靡倦怠、身体蜷缩、 竖毛、少动、喜卧、皮毛蓬乱无光泽，容易掉毛，体重减轻。经血液流 变仪检测，模型1组除中切还原黏度、低切还原黏度外，其全血黏度、 血浆黏度、红细胞压积、卡松黏度、卡松屈服应力、纤维蛋白原与空白 组比较均有升高，有显著性差异(氏O．05)。与空白组对比，模型2组 血液FT3、FT4、E2的含量降低，具有显著性差异(氏O．05)；而模型1、 2组的E2含量与空白组比较，均有显著性差异(尸O．05)。 肾虚血瘀证老年痴呆树购动物模型的初步建立与药效评：与空白组 万方数据 比较，各造模组的树嗣精神萎靡、倦怠，竖毛，少动，容易掉毛，体重 比较，各造模组的树嗣精神萎靡、倦怠，竖毛，少动，容易掉毛，体重 减轻，甚至死亡。而给药组随着时间的延长，其精神状态、体毛、体重、 活动度渐趋于正常；相比空白组，AD病组、