柴胡总多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的调节及其对大鼠急性肺损伤的影响药理学专业论文.docxVIP

柴胡总多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的调节及其对大鼠急性肺损伤的鬈缚摘要 柴胡总多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的调节及其对大鼠急性肺损伤的鬈缚 摘要 系统性红斑狼疮(SLE)和急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征(ALI／ARDS) 是临床上常见的两种疾病。SLE是一种累及多系统的自身免疫病，临床表现复 杂、病程迁延反复，病人常伴有多种异常自身抗体和补体激活，多数患者最终出 现肾功能不全，严重影响着患者的生命。ALI／ARDS是在严重感染、休克、创伤 及烧伤等非心源性疾病过程中，肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞损伤造成弥 漫性肺间质及肺泡水肿，导致的急性低氧性呼吸功能不全或衰竭。 这两种疾病在一定程度上有共同之处。首先，二者都包括于免疫性疾病的范 围内，在病变过程中伴有免疫功能的失调；第二，非特异性免疫应答发挥了重要 的作用。第三，二者的病程进展中都出现有相关炎症因子的大量释放。 柴胡是我国的传统中药和常用中药，包括伞形科多年生草本植物柴胡(北柴 胡)Bupleurum chinensis DC．和狭叶柴胡(南柴胡)Bupleurum scorzonerifolium Willd，具有抗炎及免疫调节的作用。小叶黑柴胡分布于我国西北地区，在过去 的研究中，我们从小叶黑柴胡根部提取出了柴胡多糖，并证实(1)小叶黑柴胡总 多糖(BPs)对空肠弯曲菌CJ．SⅢ诱导的系统性红斑狼疮(SLE)样小鼠有较好的 防治作用：抑制了SLE小鼠体液免疫功能亢进，抑制了脾肿大并缓解了肾损伤； (2)在ALI大鼠模型中，初步观察到小叶黑柴胡总多糖10 mg·蝇。1能缓解ALI病 理损伤，并能抑制补体过度活化和减少肺部组织中补体活化产物的沉积。 鉴于以上我们已有的药效学研究成果，结合单核巨噬系统在两种疾病中所起 的重要作用，我们观察柴胡总多糖对以巨噬细胞为代表的小鼠单核巨噬系统的作 用，以进～步了解柴胡总多糖对SLE的作用可能的靶点；在大鼠急性肺损伤模 型上，观察柴胡总多糖对其的保护作用的具体机制。 I 柴胡总多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能调节的作用 目的研究小叶黑柴胡总多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。 方法小鼠随机分组，小叶黑柴胡总多糖(BPs 20、40、80 mg·k矿2·d’2)、醋酸泼 尼松(Prednisone 3 mg·kg-I-d。1)或左旋眯唑(Levamisole 25 mg-kgLd‘1)灌胃给 柴胡总多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的调节及其对大鼠急性肺损伤的i麴药(day 柴胡总多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的调节及其对大鼠急性肺损伤的i麴 药(day 0．day 6)，观察小叶黑柴胡总多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。检 测内容包括检测药物对巯乙醇酸钠诱导的小鼠活化巨噬细胞吞噬自身凋亡细胞、 抗体介导的绵羊红细胞(SRBC)和鸡红细胞(CRBC)功能的影响；Griess法检 测药物对巯乙醇酸钠诱导的活化巨噬细胞和细菌脂多糖(LPS)诱导的炎性巨噬 细胞培养上清一氧化氮(NO)水平的影响；ELISA法检测药物对活化和炎性巨 噬细胞培养上清中肿瘤坏死因子(TNF．Q)、白细胞介素113(IL．1p)和白细胞介 素．6(IL．6)水平的影响。 结果柴胡80 mg．kg～·d-1提高了活化巨噬细胞对自身凋亡细胞的吞噬百分率和吞 噬指数(PO．001，P0．01)。柴胡20、40和80 mg·kgId。显著提高了活化巨噬 细胞对抗体介导的绵羊红细胞的吞噬百分率和吞噬指数(P．0，001)；显著促进了 活化巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率(尸O．05)和吞噬指数(尸0．01)。 柴胡20、40、80 mg·kg1d’1显著抑制了活化巨噬细胞分泌NO和IL．6的水平 (PO．001)，但对活化巨噬细胞分泌TNF一01,和IL．1B的水平无影响； 与活化巨噬细胞相比，LPS刺激的炎性巨噬细胞分泌NO、TNF．0【和IL．1B的水 平明显升高(尸O．01)。柴胡40、80 mg·k91·d～，显著降低了炎性巨噬细胞分泌 NO、TNF一01,和IL一1p的水平(P0．001)。柴胡20、40、80 mg·kgqdJ降低了炎 性巨噬细胞分泌IL一6的水平(，lO．001)。 结论柴胡总多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的功能有调节作用：促进了小鼠腹腔巨噬 细胞的吞噬能力(吞噬自身抗原、吞噬IgG调理的绵羊红细胞，吞噬鸡红细胞)： 对活化巨噬细胞释放细胞因子的影响较轻，但对炎性巨噬细胞释放的过量的NO、 TNF．0【、IL一1 D和IL一6有显著抑制作用。 2 柴胡总多糖对大鼠急性肺损伤的作用 目的研究小叶黑柴胡总多糖对大鼠急性肺损伤的保护作用及作用机制。 方法大鼠随机分为伪手术组(sham)、造模组(model)、柴胡组(BPs 2．5，5， 10，20