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采集的基本原则 1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.标本容器须无菌,但不得有消毒剂 6.送检标本应注明来源和检验目的 如何提高细菌阳性检出率? 标本采集时机 标本采集方法 标本的质与量 标本的运送与保存 镜检筛选合格标本(退检制度) 高质量、 多种分离培养基 培养环境 标本分类 1。血液及骨髓标本 2。呼吸道标本 3。泌尿生殖道标本 4。粪便标本 5。脓液及创伤感染分泌物标本 6。穿刺液标本 7。真菌感染标本 血液及骨髓标本 采集及运送 血培养指征 不明原因的发烧(>38℃)或体温过低(<36℃) 白细胞增多( >10*109/L),粒细胞减少 休克,皮肤黏膜出血,多器官衰竭,血压降低,CRP升高,呼吸加快 严重的局部感染(脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾炎,腹部术后感染,…) 心率异常加快 血 液病患者可出现粒细胞减少、血小板减少 采集血培养样本的最佳时间 尽可能在患者寒战和发热高峰30~60分钟内采血 在患者接受抗生素治疗前采血 如患者已经应用抗菌药物进行治疗,应在下一次用药之前采血培养 采血套数及部位 成人“一套” 血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个,也叫“一份” 注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套应从另一个穿刺点获得。 儿童一般只做需氧培养,但仍需从多个部位采集多次。特殊患者才考虑厌氧培养。 采血套数及部位 每位患者每次采血最少2套,3套更好 初发患者,绝不能只采1套标本,采集1套无法判断是病原菌还是污染菌。 多个穿刺部位采血。因多部位同时发 生污染的几率较小,便于对结果进判断 采血套数及部位 常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置中采集,检出污染或定植菌的可能性较大。除非怀疑导管相关性血流感染,需经外周静脉穿刺采集2套血培养,从导管中心或静脉留置口隔膜采集1套血培养,同时做血管内导管尖端(末端5cm)半定量或定量培养 关于标本采集间隔时间 对于急性感染患者,应在5分钟内从不同部位(双臂)分别采集2-3套血培养。 发热原因不明患者,在24小时内应从不同部位采血2~3套,间隔不少于60分钟 可疑急性心内膜炎患者要立即取血作血培养,起始采集3套血培养(每次间隔不少于30分钟),如果24小时内报告阴性,则继续采集2套血培养。 可疑的亚急性心内膜炎患者需在30分钟至1h内连续采集3套标本。然后才开始抗菌药的经验治疗 采集血液量 采血量是影响灵敏度最关键因素 成人一份标本2个培养瓶(需氧+厌氧),每瓶8-10ml(不少于5ml),共16~20ml;要求至少采两套标本,即40ml。 儿童一般只需采集需氧瓶,在保证采集血量<1%总血量下,一般不少于2ml, 应先将标本注入需氧瓶,然后再厌氧瓶,采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床90%以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染 采各种血液标本的先后顺序 尽量不要与其他采血同时进行 血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。 所以要最先采集血培养标本。 关于皮肤及培养瓶消毒 1、关于皮肤及培养瓶消毒 推荐使用碘酊、碘伏、70%乙醇、次氯酸作为皮肤消毒剂。 碘町、70%乙醇作用1min 碘伏作用1.5-2min 2、培养瓶的消毒程序: 去掉培养瓶口的塑料瓶盖。 70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。 自然待干。 将标本注入培养瓶内。 5. 轻轻颠倒混匀标本与肉汤,以避免血液凝集。 培养瓶的储存温度 采集后的血培养应即送检,接种前后的血培养瓶均不得冷藏,更不能冷冻。保存在15-25℃的室温即可,冷藏或冷冻会使一些微生物死亡 尿培养标本 采集及运送 尿培养送检指征 尿路感染、肾结核、泌尿系结石、膀胱排空功能受损或前列腺增生等患者,出现尿频、尿急、尿痛等膀胱刺激症状 肉眼脓尿或血尿,尿常规检查有白细胞或亚硝酸盐阳性 不明原因的发热或留置导管的患者出现发热、尿道口有脓性分泌物等症状 泌尿系统疾病手术前等情况 尿培养采集时间 应选择在抗菌药物应用之前采集尿液。 通常应采集晨起第1次尿液送检,确保尿液在膀胱内停留4小时以上 尿培养标本 清洁中段尿 导尿导管尿 经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液 不能立即送检者,可暂存4℃冰箱,但保存不超过8h 清洁中段尿液 尽量取早晨第一次尿液 嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水 女性病人 收集标本前用肥皂水冲洗外阴,再以灭菌清水冲洗尿道口 排出前段后,不停止尿流,采集中段尿 男性病人 翻转包皮,清洗尿道口 排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿 导尿管尿液 集尿袋内的尿液不能用作培养; 导尿管末端的尿液也不能用于培养,因为很难避免没有尿道菌群污染。 留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集,不能把导尿管与尿袋
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