ELISA试验的质量保证教学讲义.pptVIP

在第三次测定后，按“即刻法”计算： n=3,三次s/co值从大到小排列为： 1.71 1.81 1.90 求出x=1.81,s=0.10 计算： SI下限=1.81-1.71=1.0 0.1 SI上限=1.90-1.81=0.9 0.1 查SI值表：n=3时，n2=1.15,n3=1.15。 SI下限、 SI上限均小于n2sn3s,因此该三次检测数据在控制范围内 在第四次测定后，按上法计算： n=4 测得S /CO 值为1.81 1.71 1.81 1.81 1.90 求出x=1.81,s=0.08 计算： SI下限=1.81-1.71=1.25 0.08 SI上限=1.90-1.81=1.13 0.08 查SI值表：n=4时，n2=1.46,n3=1.49。 SI下限、 SI上限均小于n2sn3s,因此该三次检测数据在控制范围内 在第五次测定后，按上法计算： n=5 测得S /CO 值为1.09 1.09 1.71 1.81 1.90 求出x=1.66,s=0.33 计算： SI下限=1.81-1.71=1.73 0.33 SI上限=1.90-1.81=0.73 0.33 查SI值表：n=5时，n2=1.67,n3=1.75。 SI下限、 SI上限在n2sn3s之间, 因此本次检测数据处于“警告”，弃去1.09值。 在第六次测定后，按上5计算： n=5 测得S /CO 值为2.10 1.71 1.81 1.81 1.90 2.10 求出x=1.87,s=0.15 计算： SI下限=1.81-1.71=1.07 0.15 SI上限=1.90-1.81=1.53 0.15 查SI值表：n2=1.67,n3=1.75。 SI下限、 SI上限均小于n2sn3s,因此该三次检测数据在控制范围内，继续检测并计算。 当测定达到21次时，因舍去一个数据（第5个），n=20,排序如下： 1.35 1.43 1.43 1.43 1.52 1.52 1.62 1.71 1.71 1.81 1.81 1.81 1.90 1.90 1.90 2.00 2.00 2.10 2.10 2.14 X=1.76,s=0.25 SI下限=1.76-1.35=1.64 0.15 SI上限=2.14-1.76=1.52 0.15 7.1 孔间差变异的控制 ELISA检验孔与孔间的差异的调查，可以在同一块板上获取同一份质控血清至少十孔并行试验的S/CO值的均值Ｘ和标准差Ｓ． 质控血清HBsAg 1 ng/ml作孔间变异Ａ值检测，结果如下： 0.125 0.103 0.103 0.098 0.092 0.099 0.098 0.106 0.098 0.092 Ｘ=1.101 S=0.01 CV=9.3% 通过孔间的变异调查，可以了解不同试剂，不同批号，不同操作者的变异，以便于选择，改进， 了解孔间变异，就可以了解每个样品测定值的可能变动范围，对于制定处于ＣＯ值上下的样品的结果是十分有用的． 三、 仪器的质量控制 随着全自动生化分析仪的不断更新发展，目前国内已有多家引进先进的自动化酶免疫分析仪来替代ELISA法的手工操作，使试验的特性更加全面规范化。 1、全自动酶免分析仪的特点 ①、加液的精密度： ②、始终如一的洗涤： ③、环境控制： ④、QC特性/过程安全性 2、 酶标仪的简易校准和质量控制 移液器 水浴箱 洗板机 酶标仪的简易校准和质量控制 滤光片波长精度检查 通道差和孔间差检测 零点漂移即仪器稳定性观察 精密度评价 线性测定 双波长测定评价 四、开展质量控制前的准备 检验工作的质量控制应包括实验室工作的全过程，只有建立在完善的 质量管理工作基础之上，才能对测定结果进行质量控制。