Raf-河北医科大学第四医院科研处.DOCVIP

科学技术进步奖公示内容一、项目名称：Raf激酶抑制蛋白介导的信号转导对肝癌细胞乙酰肝素酶表达的影响二、提名单位：河北省卫生和计划生育委员会三、项目简介：原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，恶性程度高，易侵袭、转移及复发，且预后差，目前急需解决的问题是肝癌的早期诊断和抑制肝癌的侵袭转移，而以手术为主的肝癌的综合治疗并不能有效解决肝癌的复发转移，唯有全面认识肝癌的生物学特性，通过分子生物学方法明确肝癌的侵袭转移机制，才能有效控制肝癌的侵袭转移。Raf激酶抑制蛋白（Raf kinase inhibitor protein，RKIP）属于高度保守的磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族，广泛存在于多种生物中。RKIP参与多条信号传导通路的调控，在细胞生长、增殖、分化、凋亡等生理过程中发挥重要作用。最近研究表明RKIP与肿瘤转移密切相关， 但RKIP在肝细胞癌中的作用及其机制如何，国内外研究报道较少。乙酰肝素酶在乳腺癌、结肠癌、胃癌、肺癌、胰腺癌等多种肿瘤中异常高表达，并与肿瘤侵袭转移等有关。本项目组的研究结果及相关文献还证实乙酰肝素酶抑制剂可以抑制肿瘤的生长及侵袭转移，以上研究说明乙酰肝素酶在肿瘤侵袭转移中发挥重要作用，已经成为肿瘤治疗的新靶点。但目前对乙酰肝素酶的研究仅局限在其本身及下游作用机制方面，检索国内外文献，尚未见对乙酰肝素酶表达调控机制的系统研究。RKIP在肝细胞癌中的作用及其与乙酰肝素酶的关系有重要的研究价值。本项目首先检测肝细胞癌组织中RKIP、乙酰肝素酶及其可能相关蛋白P- RKIP、p65和P-ERK的表达，了解RKIP与肝细胞癌临床病理学特征的关系及其与P- RKIP、p65和P-ERK、乙酰肝素酶的相关性。其次，通过 RKIP基因转染或干扰体外培养的肝癌细胞，观察上调或抑制RKIP表达后肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭转移能力的变化，进一步明确RKIP在肝癌细胞侵袭转移过程中的作用。最后，检测RKIP表达或抑制后肝癌细胞Raf-MEK1/2-ERK1/2和NF-κB信号转导通路相关蛋白和乙酰肝素酶蛋白的表达，了解RKIP在肝细胞癌侵袭转移中的作用机制，RKIP是否通过下调控乙酰肝素酶表达，从而抑制肝癌细胞侵袭转移，其机制是否与Raf-MEK1/2 -ERK1/2和NF-κB信号转导通路有关。研究结果显示RKIP和P- RKIP表达的减少或缺失与肝癌的发生发展密切相关，且在抑制肝癌侵袭转移过程中共同发挥作用。RKIP抑制肝癌侵袭转移在HCCLM3肝癌细胞其机制与Raf-MEK1/2 -ERK1/2和NF-κB信号转导通路均有关，而在HepG2肝癌细胞其机制仅与Raf-MEK1/2 -ERK1/2信号转导通路有关；RKIP可能通过下调肝癌细胞乙酰肝素酶蛋白的表达抑制肝癌侵袭转移。本研究结果提示RKIP和乙酰肝素酶可能成为肝细胞癌治疗尤其是控制肝细胞癌侵袭转移的新靶点。分析总结后的论文已在《Biochimica et Biophysica Acta》、《肿瘤防治研究》、《中华肿瘤杂志》、《第三军医大学学报》等国内外核心期刊上发表。四、全部完成人及技术贡献（公示内容包括姓名、排名、技术职称、工作单位、对本项目技术创造性贡献、曾获科学技术奖励情况）：姓名排名技术职称工作单位完成单位对本项目技术创造性贡献曾获科学技术奖励情况王顺祥1主任医师教授河北医科大学第四医院河北医科大学第四医院整个课题设计总负责，参数指标选择与确定，指导实验设计及论文撰写2007年度河北省科技进步奖三等奖（第一）2017年度河北省中医药学会科学技术一等奖（第四）2017年河北医学科技奖一等奖（第一）2015年河北医学科技奖一等奖（第一）吴晓慧2副主任医师河北医科大学第四医院河北医科大学第四医院查阅文献，实验指导，组织标本的制备、细胞培养，数据整理，撰写论文2007年度河北省科技进步奖三等奖（第二）2017年度河北省中医药学会科学技术一等奖（第一）2017年河北医学科技奖一等奖（第二）2015年河北医学科技奖一等奖（第二）杨宝明3主治医师河北医科大学第四医院河北医科大学第四医院质粒转染和RNA干扰实验、MTT及流式细胞技术实验，统计数据，撰写论文2017年度河北省中医药学会科学技术一等奖（第二）2015年河北医学科技奖一等奖（第四）李建坤4主治医师河北医科大学第四医院河北医科大学第四医院Western blot实验、免疫组化、RT- PCR 检测，统计数据，撰写论文2017年度河北省中医药学会科学技术一等奖（第三）2017年河北医学科技奖一等奖（第五）2015年河北医学科技奖一等奖（第三）张越山5主治医师河北医科大学第四医院河北医科大学第四医院Matrigel侵袭实验、裸鼠实验，统计数据，撰写论文冯宁宁6主治医师河北医科大学第四医院河北医科大学第四医院上调及抑制Raf激酶抑