抗原抗体反应及其应用ppt课件.pptxVIP

抗原抗体反应及应用 傅慧 2018年2月 2 一、抗原抗体反应的基本原理 二、抗原抗体反应的类型 三、免疫标记技术的应用 内容 3 一、抗原抗体反应的基本原理 4 抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应。 抗原抗体反应 Ag Ab （ ） （ ） 如同钥匙和锁的关系 5 这种反应既可在机体内进行，也可以在机体外进行。 体内 体液免疫反应 1.中和作用: 中和毒素等 2.溶菌、杀菌、促进吞噬 3.免疫损伤: 抗体与组织或细胞反应 沉淀（Precipitation） 凝集（Agglutination） 细胞溶解（cell lysis） 补体结合（Complement fixation） 体外 抗体存在于血清中,常用血清作试验,因此又名血清学反应 6 6 6 抗原抗体反应的原理 1、抗原抗体结合力（4种） 2、抗原抗体亲和力和亲合力 3、亲水胶体转化疏水胶体 抗原抗体反应的原理 电荷引力（静电引力） 范德华引力 氢键结合力 疏水作用力 7 1、抗原抗体结合力 --静电引力（electrostatic forces） 静电引力或库仑引力（Cou-lombic forces）是因抗原、抗体带有相反电荷的氨基（—NH3+）与羧基基团（—COO-）间相互吸引的能力，之间的引力，距离越近引力越大。 8 1、抗原抗体结合力 --范德华引力（Van der Waals forces） 分子间（或原子间)相互接近，分子极化产生引力，其作用取决于分子空间构型，如：凹槽与凸起互补，抗原与抗体，酶与底物。能量小于静电引力。 9 1、抗原抗体结合力 --氢键结合力（hydrogen bond ） 是供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力。其结合力较强于范德华引力 ，能量大于范德华引力。 10 1、抗原抗体结合力 --疏水作用力（hydrophobic interactions）  水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的 排斥而趋向聚集的力。作用力最强，占总结合力的50％。 11 静电引力：异性相吸 （electrostatic forces），离子键（Ionic bond） 范德华引力: 作用最小 （van der Waals interactions） 氢键: 最具特异性 （hydrogen bond ） 疏水作用力: 作用最大 （hydrophobic interactions） 疏水作用力氢键结合力静电引力范德华引力 1、抗原抗体结合力 12 2、抗原抗体亲和力和亲合力 是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力，是抗原抗体间固有的结合力。 亲和力（affinity) 13 亲和力是指反应系统中复杂抗原与相应抗体之间的结合能力。与抗体结合价、抗体的亲和性、抗原有效表位数目等相关。 亲合力(avidity) 2、抗原抗体亲和力和亲合力 3、亲水胶体转化为疏水胶体 抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的血清学反应条件下均带有负电荷，使极化的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。当抗原与抗体结合后，表面电荷减少，水化层变薄;而且由于抗原抗体复合物形成后，与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏水胶体。此时在电解质(如NaCl，的作用下，使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形成可见的抗原抗体复合物。 14 可见反应 (沉淀) 抗原抗体复合物 (疏水胶体) 电解质 抗原 (亲水胶体) 抗体 (亲水胶体) + 15 二、抗原抗体反应的类型 16 抗原抗体反应的类型 反应类型 抗原 抗体 补体 沉淀反应 可溶 无标记 无 凝集反应 颗粒 无标记 无 补体参与反应 细胞 无标记 有 中和反应 毒素等 无标记 无 免疫标记 标记 标记 无 或 17 反应类型 实验技术 结果判断 沉淀反应 液相沉淀试验 观察沉淀，检测浊度 免疫电泳技术 观察扫描沉淀峰、沉淀弧 凝集反应 直接凝集试验 观察凝集现象 间接凝集试验 观察凝集现象 抗球蛋白试验 观察凝集现象 补体参与 反应 补体溶血试验 观察测定溶血现象 补体结合试验 观察测定溶血现象