第七章食品卫生微生物学检查PPT.pptVIP

第六章 食品微生物学检验;第一节食品中菌落总数的测定;第一节食品中菌落总数的测定;二、菌落总数测定的方法;平板菌落计数法:;1.3 用1mL灭菌吸管 吸取1∶10稀释液1ml 注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内 振摇试管混合均匀 制成l∶100的稀释液。 1.4 另取1mL灭菌吸管，按以上①和②步骤操作顺序，制10倍递增稀释液。 1.5 选择2-3个适宜稀释度，各吸取1mL分别置于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。;1.6 稀释液移人平皿后，将凉至46℃左右的平板计数琼脂培养基注入平皿约15mL，并转动平皿混合均匀。;样品稀释及做平板;注意： 每递增稀释一次，换用一次1mL无菌吸管或吸头 检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min，以防止细菌有所死亡或繁殖。 ;2.培养 待琼脂凝固后翻转平板, 置(36±1)℃恒温箱内培养(48±2)h, 水产品(30±1)℃恒温箱内培养(72±3)h。;以菌落形成单位（colony-forming units,CFU）???示 3.1 选菌落数在30～300CFU，无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。;（二） 操作步骤;（二） 操作步骤;（二） 操作步骤;（二） 操作步骤;4.1.3 若所有稀释度的平板上菌落数均大于300，则对稀释度最高的平板进行计数，其它平板可记为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释度计算。 4.1.4 若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。;4.1.5 若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。 4.1.6 所有稀释度的平板菌落数均不在30～300之间，其中一部分小于30或大于300时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数计算;4.2.1 菌落数在100以内时，按“四射五入”原则修约，采用两位有效数字报告。 4.2.2 大于或等于100时，则报告前面两位有效数字，第三位数采用“四射五入”原则修约后，取前两位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式表示。 4.2.3若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。 4.2.4若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。 4.2.5 称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告;复习题;第二节 食品中大肠菌群计数;一、大肠菌群概述 ;大肠菌群或大肠杆菌：粪便污染的指标菌;大肠菌群检验的意义 （1）判断食品中否受到粪便污染。 （2）有利于控制肠道传染病的发生和流行。 （3）有利于控制食品在生产加工、运输、保存等过程中的卫生状况。;三、大肠菌群的生物学特性;EMB平板照片及原理;麦康凯琼脂平板 Age of culture is 24 h;四、大肠菌群检验方法及操作方法;煌绿乳糖胆盐肉汤;10-1;(二) 操作步骤;2．初发酵试验;(二) 操作步骤;(二) 操作步骤;;大肠菌群平板计数法;(二) 操作步骤;(二) 操作步骤;3.平板菌落数的选择 选取菌落数在15～150 CFU之间的平板，分别计数平板上典型和可疑大肠菌群菌落。 典型菌落：紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大。;5. 大肠菌群平板计数报告 经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以3.中计数的平板菌落数，在乘以稀释倍数，即为每克（或毫升）样品中大肠菌群数。 例：10-4样品稀释液1mL，在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落，挑取其中10个接种BGLB肉汤管，证实有6个阳性管，则该样品的大肠菌群数为：100×6/10×104/g(mL)=6.0×105CFU/g(mL);1、从制备样品匀液至稀释完毕,全过程不得超过15min。 2、对产酸但未看到气泡的乳糖发酵，用手轻打动试管，如有气泡沿管壁上浮，应考虑可能有气体产生，应作进一步试验。 3、挑选菌落进行证实试验时，最少要挑2个以上的典型菌落或非典型可疑菌落进行接种。 4、不可用其他胆盐代替指定的胆盐。;六、饮用水的大肠菌群检验;复习题