gcsfri型异构体在髓系白血病细胞中的表达及其临床意义-expression of gcs fri isomer in myeloid leukemia cells and its clinical significance.docxVIP

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2018-06-04 发布于上海
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gcsfri型异构体在髓系白血病细胞中的表达及其临床意义-expression of gcs fri isomer in myeloid leukemia cells and its clinical significance

G-CSFR I 型异构体在髓系白血病细胞中的表达及其临床意义摘要目的：研究 G-CSFR I 型异构体在髓系白血病细胞中的表达及其临床意义。方法：1.收集 89 例急性髓系白血病（非急性早幼粒细胞白血病）[AML（non-APL）]患者缓解前及 21 例缓解后骨髓标本，以 9 例正常人骨髓标本作为对照，Ficoll 分离液梯度分离骨髓单个核细胞。2.收集 13 例初诊 AML (non-APL)患者外周血标本，以 10 例正常人骨髓标本作为对照，Ficoll 分离液梯度分离单个核细胞，流式细胞分选仪分选 CD34+细胞。3.实时定量 PCR（QRT-PCR）检测上述各组细胞 G-CSFR I 型异构体 mRNA的表达水平，比较其与 FAB 分型、外周血白细胞数及幼稚细胞比例的关系。4.以 HL-60 及 U937 细胞为研究对象，QRT-PCR 检测 ATRA 处理后 HL-60及 U937 细胞 G-CSFR I 型异构体的表达变化。5.MTT 法及流式细胞术检测 G-CSF 对 ATRA 诱导的 G-CSFR I 型异构体上调的 HL-60、U937 细胞增殖、分化的影响。结果：1.AML 缓解前骨髓单个核细胞 G-CSFR I 型异构体表达水平低于缓解后及正常对照两组（P＜0.05）；其中 12 例自身对照的 AML 患者有 11 例缓解前 G-CSFR I 型异构体的表达水平低于缓解后（P＜0.05）。13 例分选的 AML CD34+细胞G-CSFR I 型异构体表达水平也低于正常对照 CD34+细胞及未分选的 AML 细胞（P＜0.05）。2.AML 患者 G-CSFR I 型异构体的表达水平与外周血白细胞数（r=-0.290， p＜0.01）和幼稚细胞比例（r=-0.362，p＜0.01）呈负相关，即 G-CSFR I 型异构体表达水平低的 AML 患者，其外周血白细胞数及幼稚细胞比例越高。此外，不同 FAB 分型的 AML 患者 G-CSFR I 异构体表达水平无明显差异。3.ATRA 能显著上调 HL-60 及 U937 细胞 G-CSFR I 型异构体的表达，同时抑制细胞增殖及诱导细胞分化（P＜0.01）。4.G-CSF 能促进 HL-60 及 U937 细胞增殖（P＜0.05），而不能诱导 HL-60及 U937 细胞分化。ATRA 能抑制 G-CSF 对 HL-60 及 U937 细胞的促增殖作用（P＜0.01），G-CSF 与 ATRA 联合能促进 ATRA 对 HL-60 及 U937 细胞的促分化作用（P＜0.05）。ATRA 处理细胞 24h 后加用 G-CSF 对 HL-60 及 U937 细胞的促分化作用较两药同时用明显，但差别无统计学意义。结论：1．G-CSFR I 型异构体在 AML 患者缓解前的表达水平低于缓解后及正常人， AML 患者 G-CSFR I 型异构体的表达水平越低，其外周血白细胞及幼稚细胞比例越高。2．G-CSF 对 ATRA 诱导的 G-CSFR I 型异构体上调的 AML 细胞（HL-60、U937 细胞）有协同促分化作用。关键词：急性髓系白血病，G-CSF，G-CSFR I 型异构体，ATRAThe Expression of G-CSF Receptor Isoform I in Myeloid Leukemia Cells and its Clinical SignificanceAbstractObjective：To investigate the expression of G-CSFR isoform I in myeloid leukemia cells and its clinical significance.Methods：1. Bone marrow were obtained from 110 AML(non-APL) patients,including 89 initial treatment cases and 21 remission cases. Bone marrow from 9 cases haematologically normal individuals were collected as normal control. Bone marrow mononuclear cells were isolateded by Ficoll-Hypaque centrifugation. 2. Mononuclear cells from peripheral blood of 13 cases AML(non-APL) patients were collected. Mononuclea