gcnf在宫颈癌细胞中表达及其作用初探-expression and role of gcnf in cervical cancer cells.docxVIP

英文缩略表英 文 缩 略 词英 文 全 称中 文 全 称GCNFgerm cell nuclear factor生殖细胞核因子RTRretinoid receptor-related testis-associated receptor视黄酸受体相关睾 丸相关核受体bpbase pair碱基对kbkilobase千碱基对DABDiaminobenzidine二氨基联苯胺FITCFluoreseeinisothioeynat异硫氰酸FBSFetal bovine serum胎牛血清DMEMDulbeccos modified Eagles medium改良伊格尔培养基PBSPhosphate buffered solution磷酸盐缓冲液DMSODimethyl sulphoxide二甲基亚砜LBLuria-Bertani mediumLB 培养基cDNAcomplementary DNA互补 DNAPCRPolymerase chain reaction聚合酶链反应RTReverse Transcript逆转录dNTPdeoxy-ribonucleoside triphosphate单脱氧核苷三磷酸DEPCDiethyl pyrocarbonate焦碳酸二乙酯ODOptical density光密度AmpAmpicillin氨苄青霉素rpmround per minute每分钟转速3-（ 4,5-dimethylthiazol-2-yl ）MTT-2,5-diphenyltetrazolium bromide噻唑兰PIPhosphatidylinositoI磷脂酰亚油酸DNADeoxyribonucleic acid脱氧核糖核酸ECMExtracellular matrixc细胞外基质石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除 文中已经注明引用的内容外 ，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究 做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。 研究生签名： 时间： 年 月 日 使用授权声明 本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主 管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于赢利目的的少量复制并允许论 文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据进行检索。有权将学位论文的标题 和摘要汇编出版。必威体育官网网址的学位论文在解密后适用本规定。 研究生签名： 时间： 年 月 日 导师签名： 时间： 年 月 日 前言（Introduction）生殖细胞核因子(germ cell nuclear factor，GCNF) ，又称视黄酸受体相关睾丸相关 核受体RTR( retinoid receplor - related testis - associated recepotor 或NR6A1)，它是核受体 超家族成员之一，其cDNA最早从小鼠睾丸中克隆出来，继而在人、斑马鱼和非洲爪蟾 等物种中被克隆出来[1,2] 。因为GCNF基因配体未知，因而也称为孤儿核受体(orphan nuclear receptor)[3]。在人类，该基因定位于9号染色体的q33～q34.1[4]，其功能结构包括 DNA 结合域(DBD) 、配体结合域(LBD) 以及铰链区。GCNF 的DBD和LBD在不同物 种间具有很高的同源性，推测该基因在功能上很可能具有高度保守性[5]。有研究表明，GCNF 基因在发育中的神经系统、胎盘以及发育中的生殖细胞中高 表达[6]，且该基因在成年人及动物睾丸、附睾或卵巢中高表达[7]，而在成年动物的前列 腺、肝、脾、小肠、直肠以及脑等器官中低表达。关于GCNF功能的研究显示，GCNF 做为转录因子超家族的一员，它的主要功能是 调节基因的转录。在体外研究中，GCNF被证实是一个转录抑制因子[8,9]。它是现知的一 个对Oct - 4 有抑制作用的因子，Oct – 4基因是维持干细胞多潜能性的一个重要基因。 GCNF可以促进Oct-4基因的甲基化，使 Oct-4发生基因沉默，从而抑制其表达，使干细胞 失去多潜能性[10-12]。研究表明，GCNF在胚胎干细胞的分化及胚胎早期发育中都起着重 要的作用，GCNF基因敲除后，胚胎在10.5天时即可死亡，胚胎的神经管不能闭合，胚 胎的尾端发生缺陷等也说明了GCNF参与了神经上皮的发生与分化以及体节和中胚层的 发育[13,14]。通过GCNF基因表达谱推测，GCNF 在精子发生的启动中可能起到一个”开关” 样作用。它可能对精子发生的启动、精子核蛋白转型、精子成熟以及附睾上皮的发育和 分