hpse vegfc d240在甲状腺良恶性病变中表达及临床意义-expression and clinical significance of hpse vegfc d240 in benign and malignant thyroid diseases.docx

英文缩略语表英文缩写HPSE英文全名Heparanase中文译名类肝素酶PTCPapillary thyroid carcinoma甲状腺乳头状癌FTCfollicular thyroid carcinoma甲状腺滤泡癌MTCmedullary thyroid carcinoma甲状腺髓样癌LNMlymph node metastasis淋巴结转移EDTAEthylene diamine Tetraacetic Acid乙二胺四乙酸DAB3,3’-Diaminobenzidine3, 3’- 二氨基联苯胺MENmultiple endocrine neoplasia多发内分泌肿瘤LVDlymphatic vessel density淋巴管密度PBSPhosphate Balanced Solution磷酸盐缓冲液ISHin situ hybridization原位杂交ECMextracellular matrix细胞外基质DEPCDiethyl pyrocarbonate二乙基焦碳酸酯BMbasement membrane血管基底膜SPStreptavidin-peroxidase链霉素抗生物素蛋白- 过氧化酶 学位论文独创性声明 本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所 知，除文中已经注明引用的内容外 ，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。 对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。研究生签名：时间：年月日学位论文版权授权书本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向 国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于赢利目的的少量 复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据进行检索。有 权将学位论文的标题和摘要汇编出版。必威体育官网网址的学位论文在解密后适用本规定。研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日前言（Introduction)甲状腺癌是常见的内分泌恶性肿瘤，女性发病率高。甲状腺肿瘤中有5％- 10％为甲 状腺癌[ 1] 。其中分化型甲状腺癌占90％，包括甲状腺乳头状癌( PTC) 和甲状腺滤泡状癌 (FTC)，未分化癌较为少见，但其恶性程度高、预后差。除了上述来源于甲状腺滤泡上 皮细胞癌外，还有来源于甲状腺滤泡旁细胞( C细胞) 的甲状腺髓样癌，主要存在于多发 内分泌肿瘤(multiple endocrine neoplasia，MEN)2A和2B型中。在美国每年诊断的分化型 甲状腺癌为23500例，发病率逐年增加，尤以PTC发病率最高[ 1] 。国内资料显示我国甲状 腺癌的发病率也在明显增加[ 2] 。淋巴道转移是甲状腺癌最常见的转移方式，也是影响预后的主要因素之一。长期以 来人们对于甲状腺癌的研究主要集中于血管的形成与肿瘤生长及转移的关系上，淋巴管 形成机制及其与肿瘤扩散转移的关系尚未阐明。随着淋巴管内皮细胞相关研究进展，对 淋巴管生成进行定量检测已成为可能，研究甲状腺癌淋巴管分布以及淋巴转移的规律和 分子机制，有助于阐明淋巴管生成在甲状腺癌淋巴转移中的作用，也为临床治疗和判断 预后提供理论依据。因此，研究甲状腺癌淋巴管生成与转移扩散的关系成为了一大热点 [ 3] 。人类HPSE基因有2种亚型，Hpal和Hpa2。Hpal( 即通常所谓的肝素酶，Hpa) cDNA从 血小板和胎盘中获得，定位于4q21.3，中间序列高度保守；Hpa2基因是由乳腺组织cDNA 文库中克隆而来，定位于10q23.24, 与Hpal氨基酸序列同源性为35%[ 4] 。2000年，Dong等 [ 5] 对细菌人工染色体克隆、亚克隆、DNA测序研究发现，Hpal基因初级转录产物通过选 择性剪接表达5kb和1.7kb两种不同的mRNA剪接形式，而这两种剪接形式均含有一个相同 的开放读码框，编码一个相对分子质量为61.2x103的由543个氨基酸残基组成的多肽，该 多肽经翻译后水平的加工修饰后生成相对分子质量为8x103和50x103的两个亚单位，这两 个亚单位通过非共价键连接形成异源二聚体，生成具有活性的肝素酶[ 6 7] 。硫酸肝素蛋白多糖(heparin sulfate proteoglycan,HSPG)由一个核心蛋白和与之共价 连接的多个线性硫酸肝素 (HS) 侧链组成， HS 侧链作为细胞外基质 (extracellular matrix,ECM)和血管基底膜(basement membrane，BM)的主要成分，与其他成分紧密连接。 HS侧链上还结合着细胞表面和细胞基质上多种细胞因子、趋化因子和酶类分子，使这些 分子相对稳定和局限化[ 7 8] 。HPSE是β-1,4葡萄糖苷内切