液相色谱LC-20A(操作手册)V1.0.0.doc

目录 一 导读 2 二 软件安装 2 三 初步认识 2 四 实训内容介绍 4 1、 实训目的 4 2、 实训原理 4 3、 仪器与试剂 5 4、 色谱条件 6 5、 实验内容 7 五 仿真界面 7 液相色谱测定柠檬黄、日落黄、胭脂红的含量 导读 本仿真系统是根据岛津LC-20A气相分析仪器及岛津LCsolution工作站软件进行开发的仪器分析系统。本操作手册主要包括系统的基本操作知识以及模块的简单描述，其中工作站的使用不在本手册范围，请参加相关手册。具体的实验要求参见教师的相关教案。 软件安装 参见《仿真软件安装》。 初步认识 软件启动 安装完软件后，可以通过下属两种方式启动仿真软件： 启动方式一：在桌面点击仿真软件快捷方式：气相分析软件，双击后可以运行软件； 启动方式二：进入软件安装目录，找到PISPNETRun.exe文件，双击后可以运行。 运行方式选择 启动软件后，将会出现形如下图的界面： 图 1 如果进行单机练习，则点击“单机练习”按钮，如果需要连接教师站运行，请根据教师站配置信息输入相关基本信息以及教师站地址，然后点击“局域网模式”按钮。 出现培训项目选择界面后根据需要选择相关的培训项目（具体细节及变动根据软件培训而定）。 主界面认识 在程序加载完相关资源后，出现仿真操作主界面 图3.3.1 程序主界面上部是软件标题栏、菜单栏，主场景上部是五个功能按钮，分别是实验总览、原理图、理论测试、理论知识、实验帮助，左下方是实验室场景缩略图，其余区域为仿真操作区。 实训内容介绍 实训目的 认识液相色谱设备结构； 学习定性分析方法； 学习外标法定量分析成分含量； 了解工作站功能和操作方式； 学习色谱的理论知识。 实训原理 色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。 液相色谱分离系统也由两相——固定相和流动相组成。液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相（或在惰性载体表面涂上一层液膜）、离子交换树脂或多孔性凝胶；流动相是各种溶剂。被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。色谱分离的实质是样品分子（溶质）与溶剂（即流动相或洗脱液）以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程的保留行为。根据分离机制不同，液相色谱可分为：液固吸附色谱、液液分配色谱、化合键合色谱、离子交换色谱以及分子排阻色谱等类型。 日本岛津公司（型号）高效液相色谱，包括：LC-20AT vp PLUS溶剂输送泵（A、B泵），柱温箱、自动进样器、CBM-10A VP PLUS色谱数据工作站和电脑系统。 分析实验室常用的玻璃仪器：容量瓶、移液管、安玻瓶等。 超声波脱气仪、真空抽滤机、超纯水制水机、溶剂过滤系统等。 试剂 合成着色剂（柠檬黄、日落黄、胭脂红）标准溶液(国家标准物质中心)。 甲醇（HPLC级），蒸馏水。 色谱条件 色谱柱：梯度洗脱。 实验内容 样品预处理 选择仪器和试剂； 制备超纯水； 配置流动相； 流动相过滤； 样品制备 配置标准溶液； 数据采集 开机； 开机清洗； 平衡系统； 新建数据采集方法； 批处理； 清洗系统； 关机； 数据处理 积分； 数据比较； 标准曲线； 分析未知样； 五、实验详细步骤提示 实验过程（详细步骤） 给值 配置标准样品 配置标准样品1号（单标），点击[确定]按钮确认信息 柠檬黄10；胭脂红0；日落黄0 配置标准样品2号（单标），点击[确定]按钮确认信息 柠檬黄0；胭脂红10；日落黄0 配置标准样品3号（单标），点击[确定]按钮确认信息 柠檬黄0；胭脂红0；日落黄10 配置标准样品4号（混标），点击[确定]按钮确认信息 柠檬黄5；胭脂红5；日落黄5 配置标准样品5号（混标），点击[确定]按钮确认信息 柠檬黄7；胭脂红7；日落黄7 配置标准样品6号（混标），点击[确定]按钮确认信息 柠檬黄10；胭脂红10；日落黄10 配置标准样品7号（混标），点击[确定]按钮确认信息 柠檬黄15；胭脂红15；日落黄15 配置标准样品8号（混标），点击[确定]按钮确认信息 柠檬黄20；胭脂红20；日落黄20 目的：考察配置标准样品和样品过滤 —— 开机 —— 开机前检查：确认流动相配