仪器分析实验预习和实验报告补充.docVIP

实验2、高效液相色谱法测定可乐中的咖啡因含量 一、实验目的 1、学习高效液相色谱的基本操作2、掌握标准曲线定量分析方法3、掌握UV检测器的工作原理及应用范围。 二、实验原理 用物质配制一系列不同浓度的标准样，在一定的条件下，测标准样，标准溶液浓度峰面积标准曲线三、仪器试剂仪器：Agilent 1200 HPLC；C18高效液相色谱柱，Φ 4.6mm×15cm，填料粒度5μm；检测器（DAD）；微量进样器（25μL）条件流动相：甲醇：水=6：（V/V），1mL/min；检测波长：254nm；色谱柱温度：；进样量：10μL。试剂：无水甲醇、咖啡因（均为分析纯试剂）、市售可乐、超纯水1、流动相的配制甲醇、水分别须经0.45微米有机膜、水相膜过滤后使用2、流动相脱气：将流动相置于超声波清洗器上脱气15min（本机配自动脱气装置，脱气过程略）3、标准溶液配制：配制咖啡因20、40、80、160、320μg/mL的甲醇溶液、按仪器操作说明打计算机，进入色谱工作站，设定条件、启动色谱系统，调整仪器基线，待基线稳定7、用进样器取10μL系列标准液及样品，排出注射器中气泡，插入六通阀进样孔进样，仪器自动开始采集保存数据、实验结束后，用纯甲醇洗色谱柱及进样器，关闭标准溶液浓度峰面积标准曲线，计算可乐中咖啡因的含量μg/mL 峰面积 保留时间/min 备注 1 2 3 4 5 6 7 标准溶液 标准溶液 标准溶液 标准溶液 标准溶液 可口可乐 百事可乐 20.0 40.0 80.0 160.0 320.0 标准曲线方程： R＝ 六、思考题 1、标准曲线法定量的影响因素有哪些？ 2、什么？ 3、检测器适合于分析那些种类的物质？ 实验10、GC-MS定性混合溶剂的成分 一、实验目的 1、GC-MS的基本操作； 2、掌握GC-MS的构成及工作原理； 3、谱库检索法有机合物的方法。 二、实验原理 混合物样品在色谱柱中被分离为单一组分，依次进入质谱仪的离子源被电离成具有不同m/z）的离子，将具有不同m/z的离子分离，按照m/z由小到大的顺序依次到达接收器产生电信号并被记录，得到各组分相应的质谱图（棒图），根据质谱图可采用谱库检索法或谱图法分别对各组分进行定性分析。 三、仪器试剂仪器：GC-MS 2010 PLUS（日本岛津）试剂：条件1、色谱条件：RTX毛细管柱，Φ 0.25mm×0m，0.25μm；Tc：保持min，以10/min升温到0℃，保持1min；载气：氦气，分流比30~50:1，线速度5cm/s，流量1mL/min；Tj=200；进样量1μL。 2、EI电离源温度为200，70eV；接口温度为200；m/z扫描范围30~300、实验步骤 1、打开氦气钢瓶并调整输出压力为0.-0.5MPa，启动计算机、色谱仪及质谱仪，建立通讯联系2、启动真空系统，至真空度达到仪器规定值后进行仪器调整3、按照条件设定色谱仪、质谱仪工作参数4、仪器完成准备后，进样并按下程序启动开关5、观察测试过程，当总离子色谱图（TIC）组分峰全部流出后，停止扫描6、对TIC图中的各组分进行谱库检索序号 保留时间（min） 相对分子质量 化合物名称 式 1 2 3 4 5 6 六、思考题 1、GC-MS中GC、MS的主要作用什么GC-MS？、GC-MS适合于分析种类的样品？