法医物证教材血痕检验.pptVIP

5、注意事项： 1）抗血清效价要高： 64x 2）指示红细胞浓度要低：0.1—0.2%，新鲜。 3）关键步骤是洗涤；洗涤不足——假阳性 洗涤过分——假阴性 4）注意O型血的判定：应做抗H。 5）对照：阴性：无血痕检材基质， 阳性：已知A,B血痕。 三）混合凝集试验  （红细胞粘连试验） 1.原理：抗A，抗B抗体多为IgM, 其分子上有多个抗原结合位点，血痕与足量的抗体反应后，抗体结合到血痕相应的抗原上，形成Ag－Ab复合物，但抗体的抗原结合部位未被占满，还可以与指示红细胞发生抗原抗体反应，形成Ag－Ab－指示红细胞复合物。指示红细胞黏附于血痕上位阳性反应，不黏附为阴性反应。 1、原理； 吸附 洗涤 红细胞粘连 抗A+Ac 抗B+Bc 2、方法： 固定 甲醇、乙醚，10′挥干 吸附 4℃ ，60—120 ′ 洗涤 4 ℃，生理盐水 镜下观察 0.2％指示红细胞1滴, 30′ 3、结果： 抗A+A红细胞 抗 B+ B红细胞 血型：A型 3、血型判定；（同解离试验） —————————————————————— 检1 检2 检3 检4 A血痕 B血痕 基质 —————————————————————— 抗A+Ac + - - + + - - 抗B+Bc - + - + - + - ————————————————————————— 血 型 A型 B型 O型 AB型 对 照 准 确 ————————————————————————— 4、特点： 与解离试验类似适于微量检材 尤其适于组织切片、细胞涂片等。 A型精子 B型上皮细胞 * * 第五节 血痕的个人识别personal identification 通过对血痕遗传标记的检测，从而确定血痕是否来源于某个特定个体。 用于血痕个人识别的遗传标记 红细胞血型：ABO，MN 血清型； Hp，GC，Tf 酶型： EAP，EsD，PGM1 HLA DNA 一、ABO血型测定 1、天然抗体： 效价高，特异性好。 检测方法简单稳定。 2、抗原分布广泛： 红细胞，体液（唾液、精斑） 其他组织细胞（肌肉，毛发，骨骼） 3、抗原稳定： 检出时限长，数月、数年、数十年。 测定途径： 凝集素测定 凝集原测定：A.B.H血型物质是一种多糖体，对干燥和高温有较强的抵抗力，当红细胞变形或细胞膜碎裂，其上血型物质仍能保持与相应凝集素特异结合的能力。应此， A.B.H血型物质的检测 就成为血痕ABO血型鉴定的重点。 一）凝集素测定 1、原理； 较新鲜血痕保存抗A、抗B（凝集素） 活性，可与A型、B型指示红细胞发生凝集 反应。根据凝集反应情况，确定血痕上有 无A、B血型物质，从而判定血痕的ABO血型。 3、结果及血型判定； ————————————————————— 检1 检2 检3 检4 A血痕 B血痕 ————————————————————— Ac + - + - - + Bc - + + - + - ————————————————————— 凝集素 A B A、B - B A ————————————————————— 血 型 B A O AB 对照准确 ————————————————————— 4、注意事项： 1）凝集素蛋白稳定性差，检出时限短，约1周 2）指示红细胞浓度0.2％ ，新鲜。 3