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CB实验三 小鼠染色体标本的制备 与观察 赵 刚 生物学教研室 zgcc99@163.com 实验目的 掌握小鼠骨髓细胞染色体的制备方法； 熟悉秋水仙素、低渗、固定等处理步骤的原理； 熟悉小鼠染色体的数目与形态。 实验原理 哺乳动物的骨髓细胞分裂较旺盛，是制备染色体标本的好材料。为了获得较多中期分裂相，需用秋水仙素对细胞进行处理。 秋水仙素可作用于细胞的纺锤丝，使细胞的分裂终止于中期。 在制片过程中，需对细胞进行低渗和固定，以获得分散度与形态良好的分裂相。 实验步骤 秋水仙素处理； 收集骨髓细胞； 低渗； 预固定； 固定； 滴片； 染色； 处死小鼠→分离两根股骨→收集细胞至离心管（低渗液冲洗）→低渗 （ 10min，RT ） →预固定（加1mL固定液）→离心去上清（ 1500rpm，5min ） →固定（加6mL固定液，10min）→ 离心去上清（1500rpm，5min ） →制细胞悬液（加数滴固定液混匀）→ 滴片（用带水冷片）→染色冲洗晾干 → 镜检。 两人一组，处理一只小鼠 颈椎脱臼法处死小鼠 剪开小鼠小腹部皮肤 小鼠的2根股骨和1根胫绯骨 骨髓细胞离心后的沉淀 离心得到骨髓细胞沉淀 制备好的细胞悬液 小鼠骨髓细胞的分裂相 小鼠骨髓细胞的分裂相 小白鼠染色体的形态 小白鼠染色体数目（2n=40） 注意事项 离心管上机前需要平衡。 去上清时小心操作，避免细胞丢失。 小鼠股骨较脆，剥离股骨时应小心不要折断。 滴片时，用镊子将冷玻片取出后要立即滴上细胞悬液，并迅速吹散。 实验报告 写出实验原理、操作步骤； 绘制小鼠的一个分裂相； 《实验指导》p71：1―4题。 THE END * * 操作流程 小鼠的2根股骨
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