生化： RNA的生物合成.pptVIP

3. 转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC) 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子。 POL-Ⅱ TFⅡF ⅡA ⅡB 由RNA-Pol Ⅱ催化转录的PIC POL-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE CTD- P PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 三、转录延长 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。 RNA-Pol RNA-Pol RNA-Pol 核小体 转录延长中的核小体移位 转录方向 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA 四、转录终止 —— 和转录后修饰密切相关。 复制和转录的区别 转录中新合成的RNA往往是较大的前体分子，需要经过进一步的加工修饰才能转变为具有生物学活性的、成熟的RNA分子，该过程称为转录后加工，包括剪接、剪切、修饰和添加几种方式： 1. 剪接(splicing) 2. 剪切(cleavage) 3. 修饰(modification) 4. 添加(addition) 第三节 RNA转录后的修饰 Post-transcriptional Modification 一、真核生物mRNA的转录后加工 原核生物绝大多数mRNA转录后不再需要加工，直接翻译编码的蛋白。 真核生物的基因许多为不连续的。不连续基因的插入序列称为内含子（intron）；被内含子隔开的基因序列称为外显子（exon）。一个基因的外显子和内含子都转录在一条很大的原初转录本RNA分子中，而且很不均一，称为核不均一RNA（ hnRNA ）。 核不均一RNA包括: 内含子、外显子。 mRNA的加工包括： 1.hnRNA被剪接除去内含子转录来的序列，将外显子转录序列连接起来。 2. 3?端加上多聚腺苷酸尾巴(poly A tail) 3. 5?端形成 帽子结构(m7GpppmNp —) 4. 在内部少数腺苷酸的嘌呤碱6位氨基发生甲基化。 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA mRNA的剪接 —— 除去hnRNA中的内含子，将外显子连接。 SnRNP与hnRNA结合成为并接体 二、tRNA的转录后加工 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA 原核生物的tRNA基因的转录单元大多是多基因的(多tRNA,及rRNA)，tRNA前体的加工过程包括剪切、剪接、3’-末端添加CCAOH以及核苷修饰(脱氨、甲基化、羟基化等)转化为成熟的tRNA。 RNAase内切酶、连接酶 tRNA核苷酸转移酶 ATP ADP 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 原核细胞首先生成的是30S前体rRNA，经核糖核酸酶作用，逐步裂解为16S、23S、5S的rRNA。 三、rRNA的转录后加工 原核生物中rRNA前体的加工 甲基化作用 专一核酸内切酶 30S前体 17S tRNA 25S 专一核酸外切酶 16S rRNA tRNA 23S rRNA 5S rRNA 专一核酸外切酶 * * 目 录 12 RNA的生物合成 Chapter 12 RNA Biosynthesis, Transcription 本章重点与难点 重点：掌握RNA生物合成方式、酶类，RNA合成的起始与终止及合成后加工；核酶。 难点：RNA合成的起始与终止；真核生物RNA转录后加工。 内容 第一节： 依赖DNA的RNA合成 第二节 RNA的转录过程 第三节 转录后的修饰 第四节 核酶 第五节 以RNA为模板的RNA和DNA的合成 一、转录 (transcription) 生物体以DNA的一条链为模板在RNA聚合酶的催化下，以四种核糖核苷三磷酸为底物按照碱基配对原则，形成3’-5’磷酸二酯键，合成一条与DNA链的一定区段互补的RNA链的过程 。 转录 RNA DNA 第一节 原核生