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细胞工程 主讲人:唐勇军 1、水纯化装置 2.3.1 玻璃器皿的清洗 一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四个步骤。 (1)浸泡 : 使附着物软化或被溶解掉。 新瓶使用前应先用自来水简单刷洗,烤干,然后用稀盐酸液(5%)浸泡过夜,以中和其中的碱性物质。 要求完全浸入,不能留有气泡或浮在液面上。 浸泡一般要求过夜,甚至更长。 浸泡完成后要用清水冲洗5遍左右。 作业: 1、动植物细胞培养对环境及实验室有什么样的要求? 2、玻璃器皿的清洗方法是什么? 3、金属器械 剪刀、镊子、解剖刀、接种针等 2.3 常用器材的清洗 (2)刷洗: 浸泡后的玻璃器皿一般要用毛刷沾洗涤剂刷洗,以除去器皿表面附着较牢的杂质。刷洗要适度,过度会损害器皿表面光泽度。一般用超声波清洗器清洗代替刷洗。 洗后用清水冲洗5~10遍,烘干。 (3)浸酸: 清洁液是由重铬酸钾、浓硫酸和蒸馏水按一定比例配制而成,其处理过程称为浸酸。 清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用,而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质,是清洗过程中关键的一环。 浸泡时器皿要充满清洁液,勿留气泡或器皿露出清洁液面。 浸泡时间一般为过夜,不应少于6小时。 清洁液配方 最常用的是次强液。 新配置的清洁液为棕红色,当清洁液颜色混浊、发绿或变暗时,表明清洁液失效,应配置新液。 配置或使用清洁液时,要戴耐酸手套和围裙,以免损伤皮肤和衣服。 配置过程:先将重铬酸钾溶于水中,然后慢慢加入浓硫酸。 (4)冲洗: 玻璃器皿在使用后,刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗。使之尽量不留污染或洁液的残迹。冲洗最好用洗涤装置,省力、效果又好。 如用手工操作,则需流水冲洗十次以上,每天水须灌满及倒干净。 流水冲洗后用蒸馏水清洗3-5次,再用超纯水冲洗3遍以上,烤干或晾干备用。 * * 湖南工程学院化学化工学院 院“十佳课件”评比活动参评作品 第2章 细胞工程中的常用设备 2.1细胞工程实验室的设置 2.1.1动物细胞工程实验室的设计 因素:无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌、储存 原则:方便、隔离、无菌 无菌操作室 培养与观察室 清洗与灭菌室 制备室 储藏室 功能:细胞筛选、接种、培养基无菌制备 要求:密封、防尘、防菌 规划:更衣间、缓冲间、操作间 无菌操作室(接种室) 培养与观察室 功能:细胞培养、观察 要求:清洁,防尘 规划:观察室,培养室 功能:培养基的初制备、提取工艺的操作、细胞培养的上游和下游技术操作 要求:清洁,防尘 制备室 功能:培养器皿的清洗、灭 菌和无菌纯水的制备 要求:清洁,防尘 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 清洗灭菌室 功能:保存细胞、无菌培养基、常用液体以及消毒后的器皿等 要求:清洁,防尘 储藏室 2.1.2植物细胞工程实验室的设计 无菌操作室 培养室 清洗与灭菌室 制备室 储藏室 鉴定室 驯化移植室 因素:无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌、储存 原则:方便、隔离、无菌 2.2 细胞工程实验室常用仪器设备 常用仪器 2、超声波清洗器 3、蒸汽压力消毒器 -----大,小,手动,半自动,全自动 4、电热干燥箱 5、过滤除菌装置 6、超静工作台 水平,垂直,级数,构造 7、培养箱 8、摇床 9、移液枪 倒置显微镜 10、显微镜 普通显微镜 荧光显微镜 11、显微操作仪 12、细胞冷冻存储设备 13、细胞计数板和电子细胞计数器 ---------用于细胞技术 14、细胞融合仪 15、离心机 16、天平 17、人工气候室 1、离心管 收集细胞 常用器具 2、培养器皿 培养瓶、培养皿、培养板、细胞、三角瓶、罐头瓶
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