实验一酶的性质影响酶活性的因素(淀粉酶为例).pptVIP

一、实验目的 了解激活剂和抑制剂对酶活力的影响。 二、原理 酶的活性受某些物质的影响，能使酶活性增加的称为激活剂，能使酶活性降低的称为抑制剂。很少量的激活剂和抑制剂就会影响酶的活性，而且常具有特异性，但激活剂和抑制剂不是绝对的，浓度的改变可能使激活剂变成抑制剂。 三、试剂和器材 1. 试剂 0.5％淀粉溶液、新鲜唾液稀释液、5％氯化钠溶液、0.1％硫酸铜溶液、KI-I2溶液 2. 器材 试管和试管架、恒温水浴锅 四、操作方法 编号试管 试剂处理 1 2 3 1％ NaCl溶液/mL 1 _ _ 0.1%CuSO4溶液/mL _ 1 _ 蒸馏水 _ _ 1 0.5%淀粉溶液/mL 3 3 3 稀释的唾液/mL 1 1 1 摇匀，放入37℃恒温水浴中保温10～15min，取出，冷却 KI-I2溶液/mL 2滴 2滴 2滴 记录观察结果 取3只试管，照下表操作。 五、思考题 1．本实验中如何通过淀粉液加碘后的颜色的变化来判断酶促反应快慢的？ 2．如何通过加入班氏试剂后生成沉淀多少来反映酶促反应快慢的？ 3．通过本实验，结合理论课的学习，小结出哪些因素影响唾液淀粉酶活性？是如何影响的？ 附：移液管和移液枪的使用 附：移液管的使用： 1. 先将移液管洗净，自然沥干，并用待量取的溶液少许荡洗次。 2. 以右手拇指及中指捏住管颈标线以上的地方，将移液管插入供试品溶液液面下约1cm。左手拿橡皮吸球轻轻将溶液吸上，眼睛注意正在上升的液面位置，移液管应随容器内液面下降而下降，当液面上升到刻度标线以上约1cm时，迅速用右手食指堵住管口，取出移液管，用滤纸条拭干移液管下端外壁，并使与地面垂直，稍微松开右手食指，使液面缓缓下降，此时视线应平视标线，直到弯月面与标线相切，立即按紧食指，使液体不再流出，并使出口尖端接触容器外壁，以除去尖端外残留溶液。 3. 再将移液管移入准备接受溶液的容器中，使其出口尖端接触器壁，使容器微倾斜，而使移液管直立，然后放松右手食指，使溶液自由地顺壁流下，待溶液停止流出后，一般等待15秒钟拿出。 4. 注意此时移液管尖端仍残留有一滴液体，是否吹出看移液管标识有无“吹”字。 附：移液枪的使用： * XIAMEN UNIVERSITY 医学生物化学实验课 总学时/学分：96/3课程类型：学科通修 授课对象（人数）：14级临床 （157人） 医学院 ◆本学期的实验内容及进度安排： ◆本实验课的几点说明： 1、关于考试成绩： 平时70%+理论笔试20%+操作考试10% 其中：平时每一次实验课：考勤10%+操作50%+实验报告40%（共12-1次课，最后取平均成绩作为最终的平时成绩） 2、关于纪律问题： ◆考勤：迟到早退（30min内）1次，当次课扣10分，三次该科成绩为0。 ◆上课穿实验服，不穿者扣当次课10分，违犯三次该科成绩为0。 ◆上课期间不做与本学科无关的活动，如手机静音、不玩手机等，违犯一次扣当次课10分，违犯三次该科成绩为0。 ◆不在实验室吃、喝任何食品、饮料。违犯一次扣当次课10分，违犯三次该科成绩为0。 ◆值日生完成卫生清扫后须经实验课老师确认后方能离开。 ◆爱护实验物品，损坏应向实验老师报告登记后，方能领取新的。 3、实验注意事项： （1）遵守课堂纪律，认真做实验； 按时、认真提交实验报告（每周三或四由班长或学习委员收齐后统一交给助教批阅） （2）保持实验台面整洁； （3）药品使用； （4）仪器使用； （5）安全问题。 水、电使用，轮流值日等 （6）实验记录及实验报告 预习、保存原始实验记录、定量实验中读数要准确（有效数字）等。 实验报告书写格式（要求手写，不接受打印稿）： 实验（编号）（实验名称） （一）目的和要求 （二）原理 （三）试剂和仪器 （四）操作方法 （五）结果与讨论 4、清点、清洗器具： 对应器具清单补充齐全。 玻璃器皿清洗：洗衣粉洗剂、自来水冲洗10次以上，后蒸馏水冲洗3次，管壁水均匀分布一薄层为干净。 实验一：酶的性质：影响酶活性的因素（淀粉酶为例） 一、实验目的 观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察不同底物、温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。 二、原理 影响酶活性的因素包括：底物类型、酶浓度、底物浓度、产物浓度、抑制剂、激活剂、pH值、温度等 淀粉在淀粉酶的作用下被降解成单糖，这种降解过程是逐步进行的，降解的中间产物遇碘曾现不同的颜色： 淀粉 → 红色糊精→ 无色糊精 → 麦芽糖 → 葡