NRP与舌癌.docVIP

3 中文摘要 目的 检测Neuropilin-1(NRP-1)及其配体Semaphorin 3A(SEMA 3A)在舌鳞状细胞 癌组织和舌鳞状细胞癌SCC9细胞株中的表达情况及外源性SEMA3A蛋白对舌 鳞状细胞癌SCC9细胞株的影响。 方法 （1）应用免疫组织化学方法检测NRP-1、SEMA 3A在舌鳞状细胞癌组织 和正常舌体组织中的表达并随访舌鳞状细胞癌患者生存率。采用 SPSS17.0软件进行统计学分析。 （2）应用免疫细胞化学方法检测NRP-1、SEMA 3A在SCC9细胞系中的 表达。 （3）应用Western blot和RT-PCR方法检测NRP-1、SEMA3A在舌鳞状细 胞癌组织、舌鳞状细胞癌细胞系SCC9及正常舌体组织中的表达。 （4）应用MTT实验检测外源性SEMA3A蛋白对SCC9细胞增殖的影响。 （5）应用Transwell实验检测外源性SEMA 3A蛋白对SCC9细胞迁移、 侵袭的影响。 结果 （1）免疫组织化学显示，8/42例舌癌组织中SEMA 3A呈强阳性表达， 16/42例舌癌组织中SEMA 3A呈阳性表达，18/42例舌癌组织中 SEMA 3A呈阴性表达；8/15例正常舌组织中SEMA 3A呈强阳性表 达，5/15例正常舌组织中SEMA3A呈阳性表达，2/15例正常舌组织 中SEMA3A呈阴性表达。13/42例舌癌组织中NRP-1呈强阳性表达， 24/42例舌癌组织中NRP-1呈阳性表达，5/42例舌癌组织中NRP-1 呈阴性表达；0/15例正常舌组织中NRP-1呈强阳性表达，3/15例正 常舌组织中NRP-1呈阳性表达，12/15例正常舌组织中NRP-1呈阴 性表达。SEMA 3A、NRP-1在舌癌及正常舌体组织中的表达有显著南京医科大学硕士专业学位论文 4 性差异(P0.05)。统计结果显示舌癌组织中SEMA3A及NRP-1的表 达与患者的年龄、性别、病理分级、有无淋巴结转移、肿瘤大小、 临床分期均无关（P0.05）；随访全组患者的1、3年生存率分别为 76.2%、57.1%，SEMA 3A阳性组的1、3年生存率分别为83.3%、 62.5%，SEMA 3A阴性组的1、3年生存率分别为66.7%、50.0%，两 组间未见统计学差异。SEMA 3A强阳性组8人中仅1人于1年内死 亡，余7人生存超过3年，1、3年生存率均为87.5%，均高于SEMA 3A阴性组，但无统计学差异。NRP-1阳性组的1、3年生存率分别 为75.7%、54.0%，NRP-1阴性组的1、3年生存率分别为80.0%、80.0%， 两组间未见统计学差异。在logistic回归分析中，年龄对1年生存率 的影响及淋巴结有无转移对3年生存率的影响有统计学意义。 （2）免疫细胞化学显示，SEMA 3A在舌鳞状细胞癌SCC9细胞株中阴性 表达，NRP-1在舌鳞状细胞癌SCC9细胞株中阳性表达。 （3）Western blot和RT-PCR显示SEMA 3A在舌鳞状细胞癌细胞及组织 中阴性表达，正常舌体中阳性表达；NRP-1在舌鳞状细胞癌细胞及 组织中阳性表达，正常舌体中阴性表达。 （4）1000pM外源性SEMA3A蛋白明显抑制舌鳞状细胞癌SCC9细胞株 的增殖(P0.05)。 （5）1000pM外源性SEMA3A蛋白对舌鳞状细胞癌SCC9细胞株的迁移、 侵袭的影响未见统计学差异(P0.05)。 结论 （1）SEMA3A在舌鳞状细胞癌组织及细胞中表达降低，NRP-1在舌鳞状 细胞癌组织及细胞中表达增高，提示肿瘤的发生发展可能与其表达 异常有关。 （2）外源性SEMA3A蛋白可以抑制SCC9细胞株的增殖，可能为舌鳞状 细胞癌基因靶点治疗提供新思路。 [关键词]SEMA 3A；NRP-1；舌鳞状细胞癌；SCC9南京医科大学硕士专业学位论文 5 Abstract Objective To investigate the expression of NRP-1 and its ligand SEMA 3A in the human tongue squamous cell carcinoma tissues and cell line SCC9.The effect of exogenous SEMA 3A protein on SCC9 was observed. Methods (1)Immunohistochemical staining was used to survey the expression of NRP-1 and SEMA 3A between human carcinoma of tongue specimens and non- malignant tongue tissues,and follow-up the