单克隆抗体的制备及应用教程.pptVIP

单克隆抗体技术存在的问题 肿瘤细胞产生一些封闭性抗体, 把自己保护住, 使单克隆抗体所携的药物不能很好地发挥作用。 银屑病单克隆抗体治疗试验的失败, 也表明人类对单克隆抗体技术的应用还并不是那么得心应手, 仅仅是刚刚起步。 单克隆抗体产物是从具有肿瘤细胞表型特征细胞而来的, 来自这种细胞的产物是否有潜在的生物毒害作用, 特别是可能释放致癌病毒。 单克隆抗体可能诱发抗个体型反应, 而从抗体对其靶抗原角度看,这可能造成单克隆抗体失活。反复注射单克隆抗体, 可能造成对单克隆抗体的个体型免疫, 并使单克隆抗体失去生物活力, 这在理论上是可能的。 谢谢 老师们身体健康 同学们学习进步 单克隆抗体的制备及应用 什么是单克隆抗体 单克隆抗体的发展过程 单克隆抗体技术的应用 单克隆抗体的制备 单克隆抗体技术的研究方向和存在的问题 没有单克隆抗体前人类所遇见的问题 什么是单克隆抗体 1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上，创建立杂交瘤技术，他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠脾细胞融合，成为杂交细胞系，既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性，又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。 这种杂交瘤作单个细胞培养后，可形成单细胞系，即单克隆。利用培养或小鼠腹腔接种的方法，便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体，其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的，而且在培养过程中，只要没有变异，不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。 单克隆抗体技术发展过程 单克隆抗体技术的研究背景单克隆抗体技术 (简称单抗 ) ,又被称为肿瘤 “生物导弹 ”,是能直接导向肿瘤的药物。 1975年英国科学家 Kohler和Milstein将产生抗体的淋巴细胞同肿瘤细胞融合 ,成功的建立了单克隆抗体技术 ,因此在 1984年获得诺贝尔医学和生理学奖。 1975年Kohler和Milstein首先报道，用细胞杂交技术，使经绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠的脾细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合，并由此创建了第一个B细胞杂交瘤细胞株，获得了抗SRBC的单克隆抗体。这是免疫学，乃至医学史上的一个里程碑。 Georges J.F. Kohler Cesar Milstein 1975年将产生抗体的淋巴细胞同肿瘤细胞融合, 成功建立了单克隆抗体技术。 1984年获得诺贝尔医学和生理学奖。 单克隆抗体技术的应用 单克隆抗体的特点是：理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制，并且来源容易。这些优点使它一问世就受到高度重视，并广泛应用于生物学和医学研究领域。 早孕检测试纸条 女性在怀孕以后体内会分泌绒毛膜促性腺激素。早期检测该激素, 对女性具有非常重要的指导意义。 女性排卵检测试纸条 准确检测出尿液中促黄体生成激素的峰值水平, 使女性能预知最佳的受孕或避孕时间。 乙肝表面抗原检测试纸条 特异性地检测标本中的乙肝表面抗原, 重复性好, 质量稳定。 吗啡类毒品检测试纸条 样品中的吗啡含量大于300ng／mg，即可被检出。 癌症及其它病症的研究和治疗 全球治疗性单克隆抗体上市情况列表 单克隆抗体治疗转移性肾癌的效果 单克隆抗体的制备 单克隆抗体制备的主要仪器 杂交瘤技术原理 单克隆抗体制备的简易过程 单克隆抗体制备的主要仪器 　超净工作台、CO2恒温培养箱、超低温冰箱（-70℃）、倒置显微镜、精密天平或电子天平、液氮罐、离心机（水平转子，4000r/min）、37℃水浴箱、纯水装置、滤器、真空泵等。其需要的主要器械包括：100ml、50ml、25ml细胞培养瓶，10ml、1ml刻度吸管，试管，滴管（弯头、直头），平皿，烧杯，500ml、250ml、100ml盐水瓶，青霉素小瓶，10ml、5ml、1ml注射器等，96孔、24孔细胞培养板，融合管（50ml圆底带盖玻璃或塑料离心管），眼科剪刀，眼科镊，血细胞计数板，可调微量加样器（~50ul，~200ul，~1000ul），弯头针头，200目筛网，小鼠固定装置等。 杂交瘤技术原理简述 动物免疫 动物体内的B 淋巴细胞在特定外来抗原的刺激下, 可以大量增殖变成浆细胞, 以分泌针对该抗原的抗体。 这种抗体具有特异性, 动物免疫作用就是用特定的外来抗原对动物进行一次或多次免疫,以刺激其能分泌对于该抗原的B 淋巴细胞大量增殖, 从而得到大量产生专一反应的B 淋巴细胞。 细胞融合 B 淋巴细胞受外来抗原刺激后可以分泌抗体, 但在体外存活时间很短（最多两周）后即死亡。 而骨髓瘤细胞不分泌任何