口腔生物学精品教学（中山大学）6.口腔免疫学.pptVIP

ELISA是一种免疫测定（immunoassay，IA） ，其免疫学原理:抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。其特点： 高度特异性：保持抗原抗体反应的特异性 高灵敏度：酶催化底物显色的高效性，pg水平微量检测 定性定量检测：反应液颜色深浅或光密度值 显色 与待测抗体孵育 与酶标抗体孵育 加入底物 包被已知抗原 定性实验: 显色反应后，如液体颜色变成蓝色则为阳性；仍为无色液体，则待测样品为阴性。 根据standard的浓度和对应的OD值计算出线性方程 将所测定样品的OD值代入方程计算出相应的样品的浓度 印迹技术是20世纪分子生物学领域三大发现之一，它与内切酶的发现和PCR基因扩展技术一起给人类生物工程带来了革命性的发展。从1975年建立印迹法以来，目前有四种比较成熟的印迹方法已被广为采用，其中三种为Southern，Northern，Western 印迹法，分别用于检测DNA、RNA和蛋白质。1982年，Reinhart 将其建立的双向蛋白质印迹法自称为Eastern 印迹法，而Western 印迹法（western blot，WBT）又称为免疫印迹（immunoblot，IBT）。 蛋白样品的制备 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 转膜 封闭 一抗杂交 二抗杂交 底物显色 基础研究： 目的蛋白的表达特性分析 目的蛋白与其它蛋白的相互作用 目的蛋白的组织定位 目的蛋白的表达量分析 ??? 1. 概述 免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。 该技术的主要优缺点 主要优点：特异性强、敏感性高、速度快。 主要缺点：非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性不足，技术程序也还比较复杂。 nonspecific plaque hypothesis, all plaque bacteria were equally capable of causing disease. Disease progression were thought to result from the increase in plaque beyond a threshold level at which the hose defenses were no longer able to neutralize the plaque bacteria and their toxic products. T cells CD4+ and CD8+ T cells CD4+ is very important for host against Candida infection Cytokines IL-12 is essential for recovery from oral but not systemic candidiasis TNF apparently has a protective effect in the acute stages of both oral and systemic candidiasis Local immune system mucosa, lymph node and saliva antibody and complement in saliva and GCF serum factor inhibit the growth of Candida Oral hypersensitivity Oral autoimmune diseases When an individual immunologically primed, further contact with antigen leads to secondary boosting of the immune response The exaggerated or inappropriate immune responses cause tissue damage Labial angioneurotic edema Drug allergy stomatitis Contact stomatitis Eerythema multiforme Behcet’s disease Host exhibits exaggerated or abnormal autoimmune response to itself causing t