泌尿系统经典教学（南方医院）2017肾衰家兔药代动力学参数测定.pptVIP

* 正常及肾衰家兔药代动力学参数测定 …… 药物血浆半衰期、 表观分布容积和清除率的测定 金春华 医学基础实验教学中心 2017.3 * 目的： 1.以苯酚红为例，学习测定药物血浆浓度半衰期(T1/2)、表观分布容积(Vd)、清除率(CL)测定的基本方法 2.计算Vd、CL、T1/2及了解三者之间的关系 3.了解肾功能变化对药物代谢的影响。 * 药物的半衰期 ……一般指药物在血浆中最高浓度降低一半所需的时间。 表观分布容积（apparent volume of distribution, Vd）……指当药物在体内达动态平衡后，体内药量与血药浓度之比值称为表观分布容积。即体内全部药物按血中同样浓度溶解时所需的体液总容积。Vd可用L/kg体重表示。 血浆清除率（Plasma clearance，CL）……即单位时间内多少容积血浆中的药物被清除干净，单位为：L/h，如按体重计算单位为L·kg/h。是肝肾等的药物清除率的总和， 药物的分布与吸收在肾衰、正常家兔体内的过程是相似的。 药物的排泄在急性肾衰与正常的情况下是不同的。肾衰时药物经肾排泄减慢，可能引起药物在体内蓄积，甚至引起中毒。 HgCl2引起肾衰的原理------HgCl2主要引起急性肾小管变性、坏死导致急性肾衰。 HgCl2 肾小管上皮细胞坏死 肾脏血液灌流量 ↓ 原尿回漏 各种管型形成 入球小动脉收缩 肾间质水肿 肾小管梗阻 肾小球有效滤过压↓ 尿量↓ 有效滤过率↓ * 原理： 苯酚红酸碱指示剂，酸性条件下黄色，碱性条件下紫色 苯酚红在体内属一级动力学消除，根据血浆浓度与时间关系，可求出T1/2、Vd、CL 何为T1/2、Vd、CL？ * 器材与药品 分光光度计，高速离心机，婴儿秤 家兔动脉插管手术器械1套，玻璃试管4支，EP管3支，试管架，移液枪（200ml，1ml各1支），1ml、5ml注射器各1支 注射液：0.6％苯酚红 标准液：0.006％苯酚红 稀释液：9mg/ml NaCl 29ml+1mol/L NaOH 1ml 0.2％肝素溶液 * 方法与步骤 1.取正常or肾衰（ 1天前肌肉注射1% HgCl2溶液 1.2ml/kg.W）家兔1只，称重，20%乌拉坦5ml/kg体重麻醉(缓慢注射)，固定，左颈A（+右颈V）插管。 2. 注射器取A血1.5ml，放入EP管①中（提前用1ml注射器加入1滴 0.2％肝素抗凝剂，不要摇晃）。 2.由耳缘静脉缓慢注射0.6%苯酚红,1ml/kg(即6mg/kg），记录给药时间，于给药后5分钟、15分钟分别取A血1.5ml，置于肝素EP管②③中。 3.将以上3个EP管离心1分钟（转速8000转/分）。 4.分别从每EP管中吸出血浆（即上清）200 ml转移至另外3支试管（事先用1ml移液枪分别加入稀释液3ml/管）中，摇匀。最快的3个组测标准液OD（200 ml标准液+稀释液3ml/试管） 5.用给药前试管做对照调零，于560nm处用分光光度计测每管的光密度（OD），重复测3次。 6.计算出C1、C2，再根据公式计算出各参数值。 * 公式1-半衰期 C 标准液 = OD C 1 1 OD 标准液 C 标准液 = OD C 2 2 OD 标准液 C 标准液 = 0.006％ T = 10（两次取血的时间间隔） * 公式2-表观分布容积 D 0 = 6mg/kg×体重 （即静脉注射进入体内的药量，mg） T = 5（第一次取血的时间） 1 * 公式3-清除率 K：消除速率常数 CL = Vd × K（L/min） * 注意事项1 避免溶血：注射器要干燥；试管、EP管提前用抗凝剂湿润；离心不要太高速、太长时间 提前做好取血准备，采血时间尽可能准确。 每次取血后用注射器往三通管推入2ml生理盐水，防止管道堵塞 所加血样及试剂必须准确 样品离心必须平衡 分光光度计提前打开，预热，调零 * 注意事项2-家兔捉拿 × × × 伤两肾 皮下出血 伤两耳 * 穿刺前将注射器内空气排空，以免形成气栓 从耳缘静脉远端开始选择穿刺点 如果注射阻力较大或局部出现肿胀，应立即拔出针头，在原注射点的近心段重新穿刺 给药尽量缓慢、均匀 注意事项3-家兔耳缘静脉注射 * 思考题 怎样判断注射器已扎进耳缘静脉?耳缘静脉注射应注意哪些问题? T1/2、Vd、CL有何意义？ 动脉插管取血应注意哪些问题？