毕业论文设计SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法的改进.docVIP

编号： 　　　 2011届本科毕业论文（设计） SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 染色方法的改进 学 院 生 命 科 学 学 院 专 业 生 物 科 学 学 号 200740810235 姓　名 指导教师 职称 副教授 完成日期 2011 年 5 月 诚 信 承 诺 我谨在此承诺：本人所写的毕业论文《SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 染色方法的改进》均系本人独立完成，没有抄袭行为，凡涉及其他作者的观点和材料，均作了注释，若有不实，后果由本人承担。 承诺人（签名）： 年 月 日 目录 摘 要 1 关键词 1 Abstract 1 Keywords 1 引言 1 1. 材料与方法 2 1.1 实验材料 2 1.1.1 试剂 2 1.1.2 主要仪器、设备 2 1.2 实验方法 2 1.2.1 溶液的配制 2 1.2.2 制胶 3 1.2.3 电泳 4 1.2.4 染色 5 1.2.4.1 传统考马斯亮蓝染色法 5 1.2.4.2 水浴加热法 5 1.2.4.3 微波炉加热法 5 1.2.5 染色结果观察 6 2. 结果与分析 6 2.1 染色效果与操作的简便性 6 2.2 不同染色方法凝胶成像结果 7 2.3 染色时间 7 3．结论与讨论 8 参考文献 8 致 谢 10 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法的改进 姓名： 学号：200740810235 指导教师： （07级生物科学2班） 摘 要：针对传统的SDS- PAGE染色法耗时长，脱色所用甲醇有毒，乙醇会同时把考马斯亮蓝颜色脱去，使蛋白质条带不清晰等问题，对常染法进行了改进。本文用水浴或微波加热处理，同时改变染色液和脱色液成分，用乙醇、蒸馏水代替甲醇，大大缩短了染脱时间，经过比较，认为改进后的水浴法所耗时间大大缩短，染色效果也较好。 关键词：SDS- PAGE；考马斯亮蓝；水浴法；染色；脱色 A Modified Method for SDSStaining Name： Sun Jingfang Student Number ：200740810235 Dvisor：Ji Yuntao Abstract: For the traditional SDStime-consuming staining, Coomassie brilliant blue color can be taken off by the ethanol used for bleaching, methanol is toxic,the protein bands is not clear, and other issues,an improved method for the common dyeing is coming.By using a water bath or microwave heat treatment, at the same time changing the composition of dyeing and bleaching liquid,ethanol,distilled water instead of methanol,reducing the time of dyeing off greatly.By comparision,that the bathing method improved reduces the time significantly, dyeing better. Keywords：SDS- PAGE；coomassie brilliant blue；water bathing ；staining； decolorization 引言 继人类基因组计划之后，蛋白质组学已经成为21世纪生命科学研究的热点，对蛋白质高分辨率的分离和准确鉴定变得至关重要。目前分离蛋白质的主要方法之一就是采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS- Polyacrylamide Gel Electrophoresis, SDS- PAGE），它的支持介质是三维网状的聚丙烯酰胺凝胶。在催化剂的作用下，单体丙烯酰胺（acrylamide，Acr）与N，N-甲叉双丙烯酰胺（N,N-methylene bisacrylsmide，交联剂 ，Bis）发生聚合反应，生成凝胶介质。由于不