吉林省伊通满族自治县第三中学校高中生物选修三：1.2 基因工程的基本操作程序（二）.pptx

1.2 基因工程的基本操作程序（二）1.2 基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导入受体细胞（转化 transformation）转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内稳定存在和表达的过程。1.2 基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导入受体细胞（转化 transformation）1、将目的基因导入植物细胞（1）导入细胞的种类体细胞（2）导入方法双子叶植物和裸子植物农杆菌转化（最常用）其他植物可用酚类物质处理后用农杆菌转化1.2 基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导入受体细胞（转化 transformation）1、将目的基因导入植物细胞（2）导入方法基因枪法 花粉管通道法1.2 基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导入受体细胞（转化 transformation）2、将目的基因导入动物细胞（1）导入细胞的种类最好是受精卵细胞（2）导入方法显微注射法1.2 基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导入受体细胞（转化 transformation）3、将目的基因导入微生物细胞（1）微生物作为受体的优势①繁殖速度快，可大量生产 ②生产成本低（2）导入方法Ca2+处理1.2 基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导入受体细胞（转化 transformation）3、将目的基因导入微生物细胞（3）原核生物作为受体细胞产生的蛋白质没有空间结构，需要在体外加工。胰岛素原的人工合成1.2 基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导入受体细胞（转化 transformation）生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞导入方法农杆菌转化法（最常用）基因枪法花粉管通道法显微注射法Ca2+处理法（感受态细胞）受体细胞受精卵或体细胞受精卵原核细胞（细菌）1.2 基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导入受体细胞（转化 transformation）生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞转化过程将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→Ca2+处理导入农杆菌细胞→侵染植物细胞→目的基因整合到受体细胞的染色体上DNA上→植物组织培养→试管苗表达目的基因→产生相应性状。将含有目的基因的表达载体提纯→取受精卵→显微注射→获得导入目的基因的受体细胞→早期胚胎培养→胚胎移植→获得新性状的动物。Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组的基因表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子完成转化→目的基因表达，获得新性状。检测对象方法分子水平目的基因是否导入目的基因是否转录目的基因是否翻译个体水平受体是否具有转基因特征1.2 基因工程的基本操作程序第四步：目的基因的检测与鉴定DNA分子杂交法分子杂交法抗原－抗体杂交法抗虫鉴定、抗病鉴定活性鉴定等限制片段限制性酶切割琼脂糖电泳DNA分子DNA分子杂交带有DNA片段的凝胶用缓冲液转移DNA转移至硝酸纤维素膜上凝胶滤膜与放射性标记DNA探针杂交吸附有DNA片段的膜放射自显影抗原-抗体杂交转化到E.Coli重组体细菌启动子裂解细胞，表达蛋白转移到硝酸纤维素膜上插入的真核DNA片段32P-抗体放射自显影与放射性抗体杂交的蛋白质斑点答案：A1．以下关于PCR技术的说法不正确的是(　　)生物体内DNA的复制也称为PCR该技术操作过程中要遵循碱基互补配对原则过程中DNA的数量呈指数形式扩增可在PCR扩增仪中自动完成解析：PCR是在生物体外复制特定DNA的技术生物体内DNA的自我复制不叫PCR技术。2．如图为基因表达载体的模式图。下列有关基因工程中载体的说法错误的是(　　) A．基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建任何基因表达载体的构建都是一样的没有差别图中启动子位于基因的首端是RNA聚合酶识别和结合的部位抗生素解析：由于受体细胞有植物、动物和微生物之分以及目的基因导入受体细胞的方式不同因此基因表达载体的构建也会有所差别不可能是千篇一律的。答案：B3．下列技术中不是依据DNA分子杂交原理的是(　　)检测目的基因是否导入了受体细胞检测目的基因是否转录了mRNA检测目的基因是否翻译合成蛋白质快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量解析：DNA分子杂交就是不同来源的DNA分子的单链按碱基互补配对原则结合在一起形成杂合双链的过程。B项利用了分子杂交技术(DNA与mRNA之间杂交)DNA分子杂交原理。答案：C