16--常用的富集分离方法.pptVIP

16.5 色谱分离法 色谱分离法又称层析分离法、色层法或液相分离法，是一种物理化学分离方法，应用广泛，分离效率高。。 色谱分离法 色谱分离法 柱上色谱分离法：在充填硅胶、活性氧化铝、 纤维素等载体的柱上进行； 纸上色谱分离法：用滤纸作为载体； * 柱色谱 以吸附柱色谱为例进行讨论 固定相，如Al2O3，装柱 柱顶倾入样品(A, B) 顶部加入洗脱剂（流动相） 物质A 物质B A、B两组分随流动相的流动而向下移动。A、B在两相不断进行着的溶解、吸附、再溶解、再吸附过程中，由于在两相吸附能力的差异，达到分离。 叶绿素的石油醚溶液流经装有CaCO3的柱子，然后用石油醚淋洗. CaCO3对叶绿素各成分吸附能力不同，而分离成为色带. 叶绿素? 叶绿素 叶黄素?， ? 叶黄素? 16.5.1 纸上萃取色谱分离法 （1）方法原理 * 纸上萃取色谱分离法是在滤纸上进行的层析分离方法。滤纸作为惰性载体，滤纸纤维素中吸附的水分为固定相。 色谱分离法 * -------- Nb,Ta -------- 原点（点样点） 起点线 2cm 2cm 10cm o -------- -------- -------- Ta Nb 流动相 （有机溶剂） 前沿 固定相 （水） -------- -------- 展开剂（水+有） 流动相（有机溶剂）借助滤纸的毛细管作用，自下而上向另一端扩散。 当流动相经过原点时，试液中各组分Nb,Ta便在固定相与流动相之分 配，Rf小的组分如Nb移动慢，Rf大的组分如Ta移动快，经过一定时 间即使Nb,Ta分离开。 滤纸 * （2）比移值 =0，kD min 组分停在原点 =1，kD max 组分停在容容剂前沿 （3）应注意的几个问题 ①控制体系pH，酸化流动相，防止金属离子以多种水解形式存在，出现多个斑点，影响分离效果。 ②密闭层析筒，否则由于流动相挥发使其组成发生改变，影响Rf值， （3）应注意的几个问题 ①控制体系pH，酸化流动相，防止金属离子以多种水解形式存在，出现多个斑点，影响分离效果。 ②密闭层析筒，否则由于流动相挥发使其组成发生改变，影响Rf值，影响分离。 ③采用色谱法专用滤纸。 ④对某些溶剂而言，先将滤纸在铵盐或钠盐溶液中浸泡一下，再晾干后备用。 ⑤流动相使用的次数应根据分离的效果而定。通常，前后两次分离后，同一组分的Rf值差别大于±0.02时，应改换新鲜的溶剂。 教学内容： 富集分离的效果评价 沉淀与沉淀与富集分离法 液-液萃取富集分离法 离子交换分离法 色谱分离法 其他分离和富集方法简介 问题的提出 实际样品的复杂性 干扰的消除 控制实验条件 使用掩蔽剂 分离 separation 分析方法灵敏度的局限性 满足对灵敏度的要求 选择灵敏度高的方法 富集enrichment 16.1 富集分离的效果评价 分离效果通常用以回收率（RA）和分离因数（SB/A）表示。 式中：QA是分离出来待测组分A的量；QA0是试样中A的总量。 分析化学中，常用加标法测定回收率。对回收率的要求视待测组分含量的大小而定，如表： RA值与试样中A的含量关系 A的含量 1% ～1% ～0.01% RA 99.90% 99% 90%～95% 由于干扰组分的存在，为了精确表达分离程度，常需要引入分离因数的概念。 式中：QB和QA是分离出来待测组分B和A的量； QB0 和QA0是试样中原含有B和A的总量。 由于待测组分A的回收率一般接近100%，则分离因数可以表示如下： 分离因数越小，或B的回收率越低，A和B的分离就越完全，干扰消除得就越彻底。一般在痕量分析中，要求SB/A在10-6左右，常量分析中， SB/A在10-3以下。 16.2 沉淀与共沉淀富集分离法 16.2.1 沉淀分离法 沉淀分离法是通过沉淀反应，有选择性地使某些组分以固相化合物析出，达到分离的目的。此种方法的主要集聚是溶度积规则。 沉淀分离法 沉淀分离法中沉淀剂的选择是关键。沉淀剂以有机沉淀为主，生成的沉淀物溶解度小、分子质量大、易于过滤和洗净，以及沉淀反应具有较好的选择性和分离效果等优点。 16.2.1 沉淀分离法 （1）氢氧化物沉淀分离及溶液pH的计算 不同金属离子在溶液中沉淀完全时所需的pH各不相同，一些金属离子生成氢氧化物沉淀时的有关pH值见书P219-220。 （2）硫化物沉淀分离及溶液硫离子浓度的计算 硫化物沉淀分离的效果不理想，但通过控制溶液的酸度来控制S2-浓度，分离除去某些重金属离子是有效的。 16.2 沉淀与共沉淀富集分离