新药开发课件正交试验在医药科研中的应用(290KB).PPTVIP

结论： (1)反应温度与反应时间存在交互作用。即反应温度用50℃，反应时间宜用2小时，反应温度用70℃，反应时间宜用1小时，否则收率会明显下降。 (2)硫酸浓度用27％比用17％的收率能明显提高。(3)搅拌宜去掉。 在16种磺化工艺中，只有两种最优，即加硫酸27％在不搅拌情况下，用50℃反应2小时(或70℃反应1小时)。 例、复方丹参注射液的研制 临床用丹参、葛根、桑寄生、黄精、首乌和甘草组成复方丹参汤剂，治疗冠心病效果很好。要将它制成注射液，需要解决下列问题： (1)这六种中药组成是否合理 (2)用水煎煮，还是用乙醇渗漉能提高疗效和降低毒性 (3)除去杂质是用调pH，还是用明胶能提高疗效和降低毒性 (4)注射液中需不需要加吐温-80助溶 为了解决上述问题，设计下列试验： 正交试验表设计：总自由度加1＝fA＋fB＋fC＋fD＋fE＋fE×C＋1＝7，故选L8(27) 安排试验。  结果分析：(1)从血流量指标的R来看，B和C×E是主要的，B宜取B2，C×E宜取C1E2或C2E1，可明显地增加冠脉血流量。其它因子R较小，其水平可以任选。(2)从毒性指标的R来看，因子D、E、A的R较大，宜取D2、E2、A2能降低注射液的毒性。 结论：(1)在上述四种药方组成中，以丹参、首乌、黄精、葛根(B2)为最优处方，再加甘草、桑寄生(A1)虽不会降低冠脉流量，但毒性增加。(2)用水和60％乙醇渗漉，冠脉流量没有明显的差别，但从毒性来讲，以水为好。(3)除杂方法，调pH与加明胶无明显差异，但从毒性考虑，以采用明胶为好。(4)如果用水煎煮，则应该加吐温-80。(5)根据上述分析，最优工艺为：A2B2C1D2E2。 3、交互作用占二列举例例、抗生素培养基筛选试验 fT＋1＝fA＋……＋fH＋fA×C＋fA×C＋1＝(3－1)×8＋(3－1)(3－1)×2＋1＝25 由于8个因子均为三水平，故用L27(313)安排试验。FA×B和fA×C均是4，而L27(313)每列的自由度为2，故用两列才能安排。见表18。 结果分析： (1)确定主要因子：R13与R因相比，R13较小，可算试验误差，同时RA×B、RE、RG和R13相近，可将其合并，计算Re。Re＝(R13＋RA×B＋RE＋RG)1/5＝0.28754 与Re相比，A、F、B、C、D、H、A×C均起主要作用因子。因此最优组合为：B1(A×C)21D2F2H1。 与试验对照，如果(A×C)21换成(A×C)12、D2换成D3就是包括了较好的12号试验。从K值(A×C)21比(A×C)12、D2比D3高来看，其B1(A×C)21D2F2H1组合应比12号试验更好。因此B、D、F、H、A×C为主要因子。 (2)交互作用因子好水平的选取：(A×C)21所对应的A、C水平是A3、C3，那么A3、C3就是最好水平的搭配。 (3)最优试验的选取：根据上述分析，最优试验为：A3B1C3D2E0F2G0H1。 结论： (1)鱼粉、胨＋黄豆粉、KNO3，在培养基中不可去掉，其中，鱼粉与KNO3用量配比还要注意搭配好，否则也会降低其效价。 (2)碳源1号、丙酸、丁醇在培养基中去掉后能提高效价。 (3)(NH4)2SO4、丙二醇在培养基中加与不加对提高效价没有明显差别。 (4)该抗生素培养基的最优配方是鱼粉(A3)0.5％，胨1.5％、黄豆粉1.5％(B1)、KNO30.3％(C3)。 正交试验在医药科研中的应用 屠鹏飞 北京大学中医药现代研究中心 　　一、正交试验法的作用　　 如果采用正交试验法，可归纳成表2的试验方案： 表2的试验如果全面互相搭配进行，则要做16组，如果采用正交L8(27)法,只需做8组试验，就可得出二点可信度达95％的可靠结论。 ①影响收率的关键是硫酸浓度，即硫酸一定要采用27％，磺化温度如果采用50℃，则时间要采用2小时；磺化温度如果采用70℃，时间要采用1小时，不然收率就低。搅拌与否，对收率没有显著的影响。 ②最优化工艺不是2号，而是4号和6号。经进一步计算，4号和6号比2号平均收率高出4.73％。 从上述实例可以看出，采用正交法，既省力，又可得出科学、可信度高的结果。 二、正交试验法的基本特点 用正交法来安排试验，在于安排试验的这种正交表具备均衡分散，整齐可比特性。 (一)试验均衡分散 １、因子与水平　　完成一项研究，或一个产品的条件叫因子(因素)。例如煮大米饭，是米、水、火三个条件参与完成的，那么米、水、火就是煮饭的三个因子(因素)。　　水平是指因子(因素)所处的不同状态，即试验点。例如煮饭是早米好吃，还是用晚米好吃，早米、晚米就是不同的水平，同理每公斤米加1公斤还是加1.25公斤水好，火是大火好还是