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抑制作用的类型 不可逆的抑制作用(Irreversible inhibition) 通常以比较牢固的共价键与酶蛋白中的基团结合,而使酶失活,不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而恢复酶活性 可逆的抑制作用(Reversible inhibition) 这类抑制剂与酶蛋白的结合是可逆的,可用透析法除去抑制剂,使酶恢复活性 可逆抑制剂与游离状态的酶之间存在着一个平衡 不可逆抑制作用的分类 专一性的不可逆抑制 ▲ 仅仅和活性部位的有关基团反应 ▲ (如烷化硫基的碘代乙酸)用途更广,可以用来很好的 了解酶有哪些必要基团;还可用来探测酶的构象 非专一性的不可逆抑制 ▲ (如DFP)抑制剂能和酶上的一类或几类基团反应。 这种区别不是绝对的,因作用条件及对象不同,某些非专一性抑制剂有时会转化,产生专一性不可逆抑制作用 专一性不可逆抑制剂 1. Ks型结合型不可逆抑制剂 2. Kcat型催化型不可逆抑制剂(自杀底物) 可逆抑制作用的分类 竞争性抑制 (Competitive inhibition) 非竞争性抑制(Noncompetitive inhibition) 反竞争性抑制(Uncompetitive inhibition) 过量底物抑制(Excess Substrate Inhibition) 竞争性抑制 Competitive inhibition by active site binding ▲ 抑制剂与底物竞争,从而阻止底物与酶的结合 ▲ 竞争性抑制剂具有与底物相类似的结构,能与酶分子形 成可逆的EI复合物,但EI不能分解成产物P,酶反应速度 因此下降 ▲ 可通过增加底物浓度而解除这种抑制 Competitive inhibition by conformational change ▲ 抑制剂不是与活性中心结合,而是结合在离其较远的抑制结合位点,结合后,抑制剂使酶产生构象改变,从而 导致活性中心的改变,而不能再与底物结合 ▲ 同样,若底物先与酶结合,就会阻止抑制剂的结合 ▲ 由于在这种抑制下,底物与抑制物结合在不同部位,就不需要它们在化学结构上有任何相似性。 竞争性抑制的动力学 在竞争性抑制中,底物或抑制剂与酶的结合都是可逆的,各存在一个平衡 KI为抑制剂常数;Km为ES解离常数 当底物过量时则: 经推导可得如下曲线 非竟争性抑制 酶可以同时与底物及抑制剂结合,两者没有竞争作用 酶与底物和抑制剂结合形成ESI中间物后,不能进一步分解为产物,因此酶活性降低 这与第二种竞争性抑制机制有类似之处,区别在于:此时活性中心构象的改变并没有阻止底物的结合,而是使其不能转变成产物 非竞争性抑制的动力学 在非竞争性抑制中存在如下平衡 可推导得出如下的曲线 反竞争性抑制及其动力学 酶只有在与底物结合后,才能与抑制剂结合,即 ES+I ESI,ESI × P 在反竞争性抑制中存在如下平衡 过量底物抑制(Excess Substrate Inhibition) 一般情况下,酶促反应随着底物浓度的增加而加快;然而当底物过量时,就反而可能减慢反应速度 其作用机制可能是:当两底物分子同时向一酶进攻时,为了使自己能更接近活性中心,它们只能各自以一端与酶结合,这样反而阻碍了它们中的任一个与酶的正确结合 选择题 1.酶有多种调节控制,体内凝血酶的作用属于( )调节。 A 反馈调节 B 激素调节C 共价修饰调节 D限制性蛋白酶水解调节 2.由于细胞内酶蛋白的合成减少,使反应速度降低的作用是( )。 A 阻遏作用 B 去激活作用 C 抑制作用 D 失活作用 3.对于竞争性抑制剂,当有I存在时,下述叙述正确的是( ) A Km增大,Vm不变,Km/Vm增大。 B Km增大,Vm减小,Km/Vm增大 C Km减小,Vm不变,Km/Vm减小 D Km减小,Vm减小,Km/Vm增大 4.测定酶活性时要测定酶促反应的初速度,其目的是为了 A使酶促反应速度与酶浓度成正比 B尽快完成测定工作 C防止出现底物抑制 D使反应不受温度的影响 5.酶的比活力是指 A以某种酶的活力作为1来表示其他酶的相对活力 B每毫克蛋白的酶活力单位数 C任何纯酶的活力与其粗酶的活力比 D每毫升反应混合液的活力单位 E一种酶与另一种酶的活力比 6.关于研究酶促反应以
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