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蚬木植物组织培养技术
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食品与生物技术系
生物技术及应用
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2012年6月19日
蚬木组培之培养基配制的
蚬木Burretiodendronhsienmu(ChunetHow)别名:火果木科名:椴树科Tiliaceae形态特征常绿乔木,高达40m;嫩枝及顶芽无毛。叶卵圆形或椭圆状卵形,长8~14cm,先端渐尖或尾状渐尖,基部圆形,上面绿色,发亮,下面黄褐色,脉腋有簇毛,其余无毛,两条侧脉上升过半,有第2分枝小脉4~5条,另2条边脉靠近叶缘;叶柄长3.5—6.5cm。圆锥花序长5—9cm,有花7~13朵;花梗无节。蒴果长2~3cm,有5条薄翅。花期2~3月,果实成熟期6—7月。分布区及生态特性分布于广西南部石灰岩地区,生于海拔900m以下山区;越南北部有分布。喜暖热气候,耐寒性差;不耐水湿;幼时耐荫,以后逐渐喜光,对土壤水肥条件要求较高,宜在腐殖质丰富、pH值为6.2~7.2的石灰土壤生长;生长速度中等萌芽力强。种子采集及处理选择30一50年的优良健壮母树采种。果实成熟由青色转黄色,种子成熟期极整齐,且成熟后即开裂,需认真把握采种期,应在种子散落前及时采集。采回的果实不能脱水,忌暴晒和堆沤,以免发热,摊放在阴凉通风处,开裂后得到带有果瓣的种子,即可用作播种材料,宜随采、随运、随播。需调运时,可在采摘后带果瓣及时运送,用竹篓或木箱包装,以防堆积发热而发芽。濒危的主要原因是其经济价值高,可作砧板、家具、建筑、造船、车轴、机械势木等用途,造成大量的大树被砍伐,而作工具柄和被砍伐作为薪柴又使得蚬木居群缺乏小树,更新困难。虽然蚬木被列为国家Ⅱ级保护植物,但其保护现状不容乐观,而且对经济作物(如橡胶林)的开发也在逐步蚕食蚬木日益缩小的分布区域。
为了对蚬木种苗进行如同兰花组培苗产业化生产进而获取蚬木组组培苗,本人结合有关蚬木的课外知识和这个学期所学习的《植物组织培养技术》这一门课程学习到的知识,对蚬木组培苗培养基的配制进行了一次试验性的探索本人在各种书籍上、网络上都没有有关蚬木组培技术的相关介绍,可想而知蚬木组培苗培养的难度是非常大的,难度极有可能是来源于培养基配方的问题,如果在培养基上能有所突破,蚬木将不再受种子发芽率低的限制,在科学上也是一种进步。
这次蚬木组培苗探索培养基的配制分有三个步骤,即:
㈠ 成分 用量(/mg·L-1) NH4NO3 1650 KNO3 1900 CaCl2·2H2O 440 MgSO4·7H2O 370 KH2PO4 170 KI 0.83 H3BO3 6.2 MnSO4·4H2O 22.3 ZnSO4·7H2O 8.6 NaMoO4·2H2O 0.25 CuSO4·5H2O 0.025 CoCl2·6H2O 0.025 FeSO4·7H2O 27.8 Na2·EDTA 37.3 肌醇 100 烟酸 0.5 维生素B6 0.5 维生素B1 0.1 甘氨酸 2.0 蔗糖 30 ㈡
White培养基 药品名称 用量(mg/L-1) 柠檬酸 2.0 硫酸钠 53.0 氯化钾 65.0 磷酸二氢钠 19.1 盐酸硫胺素(维B1) 0.1 硝酸钾 80.0 盐酸 0.5 甘氨酸 3.0 硫酸锰 6.6 硫酸锌 2.7 碘化钾 0.75 盐酸吡哆素(维B6) 0.1 硼酸 1.5 硫酸镁 738.0 硝酸钙 287.0 蔗糖 20000 种? 类 配制方法 常用浓度(mg/L) 功? 能 细胞分裂素 6~BA 先用少量0.5N~1.0N的盐酸(HCl)溶解,然后加蒸馏水定容。 0.1~2.0 促进细胞分裂与扩大,诱导芽的分化,促进侧芽萌发生长,抑制顶端优势;常与生长素配合使用,用以调节细胞分裂、细胞伸长、细胞分化和器官形成。 KT 0.05~2.0 ZT 0.05~2.0 2ip 0.05~2.0 生长素 IAA 先用少量1.0N的KOH或NaOH溶解,然后加蒸馏水定容。 0.1~1.0 促进细胞伸长生长和细胞分裂 0.5~5.0 促进不定根和侧根形成 IBA 0.05~1.0 促进细胞伸长生长和细胞分裂 0.2~5.0 促进不定根和侧根形成 NAA 0.01~0.5 促进细胞生长和扩大 0.2~2.0 促进生根 2,4~D 0.01~0.5 诱导愈伤组织和胚状体的产生 赤霉素 GA3 先用少量酒精溶解,然后加水定容。 0.0~0.2 诱导细胞伸长生长 乙烯 C2H4 促进芽的诱导和生长
依照以上各种成分及用量标准,本人试探性的罗列出了以下蚬木培养基的配方:
㈠
0.6% PH值
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