神经元分离步骤SOP16.docVIP

下载本文档

47
0
约小于1千字
约 3页
2018-05-24 发布于河南
举报
版权申诉

神经元分离步骤SOP16.doc

1、本文档共3页，可阅读全部内容。
2、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

神经元分离步骤SOP16

Standard Operation Protocol（SOP）技术方法名称:神经元的分离、培养操作步骤: 3日内出生的新生鼠数只用大手术剪断头 ↓ 用眼科剪剪开头皮与颅骨，暴露大脑两半球 ↓ 弯头镊小心剥离软脑膜及表面血管 ↓ 弯头镊夹取大脑皮层组织，放入冰上装有解剖液的小烧杯 ↓ 眼科剪剪碎脑组织至1mm3大小 ↓ 弃去原解剖液，加入新解剖液 ↓ 移入15 ml离心管中，静置 ↓ 去上清（解剖液，含血清，影响胰酶消化） ↓ 加入4倍体积的0.25％胰酶，轻柔吹打数下，37℃消化5min ↓ 吸出上清液至装有少量小牛血清的15ml离心管中，终止消化 ↓ 共反复数次（不超过6次）至消化完全 ↓ 汇集数次消化后上清，过180目筛 ↓ 移入离心管，800r/min，7min ↓ 吸去上清，用含3ml10％胎牛血清5%马血清的DMEM培养液重悬细胞 ↓ 细胞计数，调整细胞密度为5×105 ↓ 种入铺好多聚赖氨酸的培养皿或96孔板中，37℃5%CO2培养箱中培养 ↓ 24h后，用含2%B27的神经元培养基换液 ↓ 分离48h，加入阿糖胞苷抑制胶质细胞 ↓ 24h换去含阿糖胞苷的培养基，每3天半换液广东药学院药科学院新药筛选与药效评价中心 SOP16