Chk1及Chk2反义寡核苷酸对DDP诱导白血病原代细胞凋亡影响的研究.pdfVIP

维普资讯 · 362 · JournalofClinicalHematology，Nov2006，Vol19No6 Chkl／2反义寡核苷酸对 DDP诱导白血病 原代细胞凋亡影响的研究 黄伟 张瑶珍 周剑锋 刘文励 [摘要] 目的：观察 白血病原代细胞在顺铂作用下细胞周期变化和转染 Chkl／2反义寡核苷酸对顺铂诱导 原代细胞凋亡 的影响。方法 ：用 RT—PCR、westernblot及免疫组化检测 白血病骨髓单个核细胞 (BMMNC)中 Chkl和Chk2的表达，用流式细胞仪检测顺铂作用下 白血病BMMNC细胞周期变化。以脂质体作为载体，转染 Chkl／2反义寡核苷酸于BMMNC，用流式细胞仪检测转染 Chkl／2反义寡核苷酸后顺铂作用下 BMMNC细胞凋 亡率。结果：在 白血病BMMNC中，Chkl和 Chk2mRNA水平均存阳性表达，Chkl蛋 白表达强，而 Chk2蛋 白表 达弱 。10btmol／L顺铂作用下 BMMNC出现 S期阻滞 ，转染 Chkl反义寡核苷酸可 明显增加顺铂诱导下 BMMNC 凋亡率，转染Chk2反义寡核苷酸不能增加顺铂诱导下BMMNC凋亡率。结论 ：Chkl可作为 白血病增敏治疗的 有效靶点。 [关键词] 白血病；转染；凋亡 [中图分类号] R733．7 [文献标志码] A [文章编号] 1004—2806(2006)06—0362—03 Studyofinfluenceofantisense0lig0nucle0tidetargetingChkl／2 onapoptosisofbonemarrow mononucleatecells(BMMNC) ofleukemiainducedbyDDP HU_ANGWei ZHANGYaozhen ZH0UJianfeng L儿， Z (DepartmentofInternalMedicine，TongjiHospital，TongjiMedicalCollegeofHuazhongSci— ence TechnologyUniversity，Wuhan430030。China) Abstract Objective：Toinvestigatethechangeofcell—cycleofleukemicbonemarrow mononucleatecells (BMMNC)inducedbyDDPandroleofantisenseoligonucleotidetargetingChkl／2onapoptosisofBMMNCin— ducedbyDDP．Method：ToinvestigatetheexpressionofChklandChk2inBMMNC byRT—PCR，westernblotand Immunohistochemicalanalysis，toobservethechangeofcell—cyclebyflow cytometerafterdifferentintervalin whichBMMNC weretreatedbyDDP．ApoptosisofBMMNC inducedbyDDPwasinvestigatedbyflow cytometer aftertransfectionwithantisenseoligonucleotidetargetingChkl／2bylipofection．Result：ThelevelofChkland Chk2mRNA andChklproteinhad nosignificantdifferencebetweentheleukemiaandcontrol，butthelevelof Chk2proteinwaslow．BMMNC arrestedatSphaseat10uM