食物中成分对沙门氏菌pcr检测灵敏度的影响.pdfVIP

理 PCR 靈度 CNFH-88-06 行87 年9 1 88 年6 30 類 隆 PCR 留PCR 量 PCR 量BHI 量 LB 類 SDS phenol 留類留starch 不類留 PCR 量 類 SDS 利 來來離落 連串 來數 (1) 例 六 不 (2) 更更靈 (Polymerase Chain Reaction, PCR )不若DNA (3) 利 數靈度 1 量C.C 10 (primer)理論 (4.5.6.7.8.9.10.11) PCR 不 PCR 行cheese PCR PCR 連 PCR 靈度降PCR 靈度降列 PCR PCR 靈度 PCR PCR 1 料 料 Salmonella (ST80) DNA 20 ml LB BHI 37 0.5 ml 7000rpm 離 10 離-20冷冷 裂 0.2ml 量離(Enppendorf tube)lOmM dATP, dTTP, dGTP dCTP 1 ul lOXPCR (1OmM Tris-HCl,(pH8.3),500mM KC1, 60mM MgCl2 O.1gelatin 1Triton X-100) 5u1 25 pmoles/ul TS4 TS11 2 ul DNA 20 ul 5Oul 10Oul (Mineral oil) (perkin elmer PCR system 2400)行PCR 94 18 3 0.4 ul 1.25 unit Taq DNA 行 9430sec 降5550sec 行 (Extension) 7250 sec 722 30 行PCR 10ul PCR 1u1 BPB (Bromophennol blue) 1.8度行 PCR 量marker 100bp ladder 量 (MBI Fermentas, USA) PCR 列 primers sequence (G+C)% Tm location (bp) TS11 GTCACGGAAGAAGAGAAATCCGTACGG 50 78 26-51 TS4 GCGGATCGTGCAACTGCGGTACGTA 60 76 1180-1204 PCR , TS11/TS4 1179 bp. PCR 靈度不 LB BHI yeast extract tryptone NaCl DNA NaOH chloroform phenol SDS starch glucose sucrose 類beef, pork, chicken, 拉拉 10ul PCR 1u1 BPB