微生物学检验需氧革兰阳性杆菌及检验参考.pptVIP

革兰阳性需氧或兼性厌氧杆菌 白喉棒状杆菌 属棒状杆菌属 是引起白喉的病原体 主要以外毒素致病 白喉棒状杆菌－－形态染色 革兰阳性细长、棒状杆菌，无芽孢，无荚膜、无芽孢 排列不规则 胞浆中有易染颗粒（重要形态学特征） 异染颗粒染色法： 阿伯脱然色 奈瑟染色 白喉棒状杆菌－－培养特性 需氧或兼性厌氧 营养要求高 菌落特征 ●血平板：灰白、狭窄溶血环 ●鸡蛋斜面和血清斜面：生长迅速，灰白色有光泽菌落 ●亚碲酸钾血平板：为选择培养基，菌落 呈黑色。菌落分为重型、轻型或中间型 白喉棒状杆菌－－生化反应和抗原结构 生化反应 分解葡萄糖、麦芽糖、果糖等 不分解乳糖、多数不分解蔗糖 靛基质试验－、明胶液化－、尿素分解－ 抗原构造 K抗原：型特异性抗原，不耐热 O抗原：与分枝杆菌、奴卡菌有共同抗原 白喉棒状杆菌－－临床意义 致病物质：白喉外毒素 由携带β-棒状杆菌噬菌体的白喉杆菌产生。 抑制蛋白质的合成。 经呼吸道飞沫感染，引起白喉。 假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因 中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因 抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用 锡克试验用于检测机体有无白喉抗毒素免疫 白喉棒状杆菌－－检验程序 白喉棒状杆菌－－标本采集和检查方法 咽拭标本 标本直接涂片 革兰染色：观察形态、染色性 异染颗粒染色：观察异染颗粒 初步报告：检出形似白喉棒状杆菌 分离培养 吕氏斜面：生长迅速，涂片镜检异染颗粒明显 亚碲酸钾血平板：黑色菌落 白喉棒状杆菌－－毒力试验 意义：是鉴定白喉杆菌为致病菌株的重要依据 方法 艾立克平板毒力试验 对流电泳法 协同凝集试验 动物实验 需氧芽孢杆菌属 是一大群下枯杨，能产生芽孢的革兰阳性大杆菌。 种类： 炭疽芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 蜡样芽孢杆菌 多粘杆菌等 炭疽芽孢杆菌－－形态染色 革兰阳性粗大杆菌，两端平截，呈竹节状，链状排列 可形成荚膜、芽孢，无鞭毛 炭疽芽孢杆菌－－培养特性 需氧或兼性厌氧 营养要求不高，普通培养基上生长良好 干燥、边缘不整的粗糙型菌落，低倍镜下边缘呈“卷发状” 液体培养基中呈絮状生长 明胶培养基中呈倒置的杉树 有毒株在NaHCO3培养基中形成荚膜，菌落呈粘液状，有拉丝 炭疽芽孢杆菌－－抗原结构与抵抗力 抗原结构： ※炭疽毒素：由保护性抗原、致死因子、水肿因子组成，具有毒性作用。三种成分单独存在无致病作用。 ※菌体抗原：耐热、耐腐败，能与相应抗体结合发生沉淀反应，用于Ascoli试验 抵抗力：本菌芽孢抵抗力强，芽孢对碘和氧化剂敏感 耐药性：本菌对青霉素、氨基糖甙类、四环素类、环丙沙星敏感 炭疽芽孢杆菌－－临床意义 致病物质 　炭疽毒素、荚膜 所致疾病 　经多途径感染，引起炭疽病 　临床类型：肺炭疽、肠炭疽、皮肤炭疽、败血症 　属人畜共患传染病，死亡率高 炭疽芽孢杆菌－－标本采集和处理 标本采集 　病人血液、痰、粪便、渗出液、脑脊液等 　死亡病畜标本：死亡牲畜严禁宰杀 　污染物品：皮革、兽毛、土壤等 标本处理：无杂菌污染标本直接接种，有杂菌污染标本先加热杀死繁殖体和杂菌再接种 炭疽芽孢杆菌－－检查方法 涂片染色镜检 　革兰染色：涂片后升汞固定；发现革兰阳性粗大杆菌、有荚膜，竹节样排列可初步报告 分离培养：污染的标本先加热处理再接种 动物试验：注射部位胶样水肿，肝脾肿大，出血等。 炭疽芽孢杆菌－－鉴定试验 青霉素抑制试验：与其他需氧芽孢杆菌鉴别 串珠试验：与其他类炭疽芽孢杆菌鉴别 青霉素和串珠联合试验 噬菌体裂解试验：与类炭疽芽孢杆菌鉴别 重碳酸盐毒力试验 植物凝集素试验 Ascoli试验 蜡样芽孢杆菌 革兰阳性杆菌，短链状排列，有芽孢和鞭毛 菌落粗糙呈蜡状，β溶血，液体培养基中呈混浊和菌膜生长 液化明胶、卵磷酯酶＋ 产生两种类型肠毒素，引起食物中毒 微检：细菌培养鉴定、活菌计数定量（13～36×106） 分枝杆菌属 分枝杆菌属主要特点 是一类直或微弯曲、有分枝生长趋势的杆菌。 细胞壁脂质含量高，主要为分枝菌酸。 具有抗酸性，革兰染色不易着色，常用抗酸染色。 专性需氧营养要求特殊，大多数生长缓慢。 不产内、外毒素和侵袭性酶等致病物质，所致疾病呈慢性。 分枝杆菌属种类 结核分枝杆菌－－形态染色 细长略弯，分枝生长趋势 无芽孢，无鞭毛，部分菌株有荚膜 革兰染色阳性，不易着色 抗酸染色阳性 结核分枝杆菌－－培养特性 生长条件： 专性需氧、细胞内寄生菌、最适pH6.5～6.8、营养要求高、培养基含鸡蛋、马铃薯粉、甘油、孔雀绿等 生长现象：